人體寄生蟲(chóng)學(xué):第二節(jié)　剛地弓形蟲(chóng)

剛地弓形蟲(chóng)（Toxoplasma　gondii Nicolle　& Manceaux，1908)是貓科動(dòng)物的腸道球蟲(chóng)，由法國(guó)學(xué)者Nicolle及Manceaux在剛地梳趾鼠（Ctenodactylus 　gondii)單核細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)，蟲(chóng)體呈弓形，命名為剛地弓形蟲(chóng)。該蟲(chóng)呈世界性分布，人和許多動(dòng)物都m.f1411.cn/Article/能感染，引起人畜共患的弓形蟲(chóng)病，尤其在宿主免疫功能低下時(shí)，可造成嚴(yán)重后果，屬機(jī)會(huì)致病原蟲(chóng)（opportunistic 　protozoan)。

形態(tài)

弓形蟲(chóng)發(fā)育的全過(guò)程，可有5種不同形態(tài)的階段：即滋養(yǎng)體、包囊、裂殖體、配子體和卵囊。

滋養(yǎng)體　是指在中間宿主在核細(xì)胞內(nèi)營(yíng)分裂繁殖的蟲(chóng)體，又稱(chēng)速殖子（tachyzoite)。游離的蟲(chóng)體呈弓形成月芽形，一端較尖，一端鈍圓；一邊扁平，另一邊較膨隆。速殖子長(zhǎng)4～7µm，最寬處2～4µm。經(jīng)姬氏染劑或瑞氏染劑染色后可見(jiàn)胞漿呈藍(lán)色，胞核呈紫紅色。核位于蟲(chóng)體中央，在核與尖端之間有染成淺紅色的顆粒稱(chēng)副核體。游離蟲(chóng)體能在螺旋式轉(zhuǎn)動(dòng)。細(xì)胞內(nèi)寄生的蟲(chóng)體呈紡錘形或橢圓形，可以?xún)?nèi)二芽殖、二分裂及裂體增殖三種方式不斷繁殖，一般含數(shù)個(gè)至十多個(gè)蟲(chóng)體。被個(gè)被宿主細(xì)胞膜包繞的蟲(chóng)體集合體稱(chēng)假包囊（pseudocyst)（圖12－5)，增殖至一定數(shù)目時(shí)，

圖12－5　弓形蟲(chóng)在人體內(nèi)寄生的形態(tài)

胞膜破裂，速殖子釋出，隨血流至其它細(xì)胞內(nèi)繼續(xù)繁殖。電鏡下，速殖子表膜由兩層組成，外層包繞整個(gè)蟲(chóng)體，在側(cè)緣向內(nèi)凹陷而成胞口樣微孔，內(nèi)層稍厚，在前端、側(cè)端和后端有類(lèi)錐體（conoid)及極環(huán)（polar 　ring)。類(lèi)錐體是由一組或幾組向上旋曲而中空的弓形線(xiàn)組成。棒狀體（rhoptry)8～10條呈球棒狀，為腺體樣結(jié)構(gòu)，是類(lèi)錐體向后延伸的部分。胞核位于蟲(chóng)體后半部，核仁位置不定，高爾基體常位于核的前沿凹陷處，呈膜囊樣結(jié)構(gòu)；線(xiàn)粒體一至數(shù)個(gè)；蟲(chóng)體還有發(fā)達(dá)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、溶酶體和核糖體（圖12－6)。當(dāng)蟲(chóng)體進(jìn)行內(nèi)二芽殖分裂時(shí)可見(jiàn)到：蟲(chóng)體內(nèi)細(xì)胞器消失，胞核的

圖12－6　弓形蟲(chóng)速殖子模式圖

前沿分裂成2個(gè)突起物，逐漸伸展形成2個(gè)子核，恢復(fù)所有細(xì)胞器，蟲(chóng)體分裂成2個(gè)蟲(chóng)體（圖12－7)。

圖12－7　弓形蟲(chóng)速殖子內(nèi)二芽殖分裂過(guò)程模式圖

包囊圓形或橢圓形，直徑自5µm至100µm,具有一層富有彈性的堅(jiān)韌囊壁。囊內(nèi)滋養(yǎng)體稱(chēng)緩殖子（bradyzoite)可不斷增殖，內(nèi)含數(shù)個(gè)至數(shù)百個(gè)蟲(chóng)體，在一定條件下可破裂，緩殖子重新進(jìn)入新的細(xì)胞形成新的包囊，可長(zhǎng)期在組織內(nèi)生存。

裂殖體　在貓科動(dòng)物小腸絨毛上皮細(xì)胞內(nèi)發(fā)育增殖，成熟的裂殖體為長(zhǎng)橢圓形，內(nèi)含4～29個(gè)裂殖子，以10～15個(gè)居多，呈扇狀排列，裂殖子形如新月?tīng)�，前尖后鈍，較滋養(yǎng)體為小。

配子體　由游離的裂殖子侵入另一個(gè)腸上皮細(xì)胞發(fā)育形成配子母細(xì)胞，進(jìn)而發(fā)育為配子體，有雌雄之分。雌配子體呈圓形，成熟后發(fā)育為雌配子，其體積可不斷增大達(dá)10～20µm，核染成深紅色，較大，胞質(zhì)深藍(lán)色；雄配子體量較少，成熟后形成12～32個(gè)雄配子，其兩端尖細(xì)，長(zhǎng)約3µm，電鏡下可見(jiàn)前端部有2根鞭毛。雌雄配子受精結(jié)合發(fā)育為合子（zygote)，而后發(fā)育成卵囊。

卵囊　剛從貓糞排出的卵囊為圓形或橢圓形，大小為10～12µm；具兩層光滑透明的囊壁，內(nèi)充滿(mǎn)均勻小顆粒。成熟卵囊含2個(gè)孢子囊，每個(gè)分別由4個(gè)子孢子組成，相互交錯(cuò)在一起，呈新月形。

生活史

弓形生活史包括有性生殖和無(wú)性生殖階段，全過(guò)程需兩種宿主，在貓科動(dòng)物體內(nèi)完成有性世代，同時(shí)也進(jìn)行無(wú)性增殖，故貓是弓形蟲(chóng)的終宿主兼中間宿主。在其它動(dòng)物或人體內(nèi)只能完成無(wú)性生殖，最為中間宿主。有性生殖只限于在貓科動(dòng)物小腸上皮細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行，稱(chēng)腸內(nèi)期發(fā)育。無(wú)性生殖階段可在腸外其它組織、細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行，稱(chēng)腸外期發(fā)育。弓形蟲(chóng)對(duì)中間宿主的選擇極不嚴(yán)格，除哺乳動(dòng)物外，鳥(niǎo)類(lèi)、魚(yú)類(lèi)和人都可寄生，對(duì)寄生組織的選擇也無(wú)特異親嗜性，除紅細(xì)胞外的有核細(xì)胞均可寄生（圖12－8)。

圖12－8　剛地弓形蟲(chóng)生活史

1．中間宿主內(nèi)的發(fā)育　當(dāng)貓糞內(nèi)的卵囊或動(dòng)物肉類(lèi)中的包囊或假包囊被中間宿主如人、羊、豬、牛等吞食后，在腸內(nèi)逸出子孢子、緩殖子或速殖子，隨即侵入腸壁經(jīng)血或淋巴進(jìn)入單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)寄生，并擴(kuò)散至全身各器官組織，如腦、淋巴結(jié)、肝、心、肺、肌肉等進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)發(fā)育繁殖，直至細(xì)胞破裂，速殖子重行侵入新的組織、細(xì)胞，反復(fù)繁殖。在免疫功能正常的機(jī)體，部分速殖子侵入宿主細(xì)胞后，特別是腦、眼、骨骼肌的蟲(chóng)體繁殖速度減慢，并形成包囊，包囊在宿主體內(nèi)可存活數(shù)月、數(shù)年，甚至終身不等。當(dāng)機(jī)體免疫功能低下或長(zhǎng)期應(yīng)用免疫抑制劑時(shí)，組織內(nèi)的包囊可破裂，釋出緩殖子，進(jìn)入血流和其他新的組織細(xì)胞繼續(xù)發(fā)育繁殖。包囊亦中間宿主之間或終宿之間互相傳播的主要形成。

2．終宿主內(nèi)的發(fā)育　貓或貓科動(dòng)物捕食動(dòng)物內(nèi)臟或肉類(lèi)組織時(shí)，將帶有弓形蟲(chóng)包囊或假包囊吞入消化道而感染。此外食入或飲入外界被成熟卵囊污染的食物或水也可得到感染。卵囊內(nèi)子孢子在小腸腔逸出，主要在回腸部侵入小腸上皮細(xì)胞發(fā)育繁殖，經(jīng)3～7天，上皮細(xì)胞內(nèi)的蟲(chóng)體形成多個(gè)核的裂殖體，成熟后釋出裂殖子，侵入新的腸上皮細(xì)胞形成第二、三代裂殖體，經(jīng)數(shù)代增殖后，部分裂殖子發(fā)育為配子母細(xì)胞，繼續(xù)發(fā)育為雌雄配子體，雌雄配子受精成為合子，最近形成卵囊，破出上皮細(xì)胞進(jìn)入腸腔，隨糞便排出體外，在適宜溫、濕度環(huán)境中經(jīng)2～4天即發(fā)育為具感染性的成熟卵囊，貓吞食不同發(fā)育期蟲(chóng)體后排入卵囊的時(shí)間不同，通常吞食包囊后約3～10天就能排出卵囊，而吞食假包囊或卵囊后約需20天以上。受染的貓，一般可排出1000萬(wàn)／日卵囊，排囊可持續(xù)約10～20天，其間排出卵囊數(shù)量的高峰時(shí)間為5～8天，是傳播的重要階段，卵囊具雙層囊壁，對(duì)外界抵抗力較大，對(duì)酸、堿、消毒劑均有相當(dāng)強(qiáng)的抵抗力，在室溫可生存3～18個(gè)月，貓糞內(nèi)可存活1年，對(duì)干燥和熱的抗力較差，80℃1分鐘即可殺死，因此加熱是防止卵囊傳播最有效的方法。

致病

1．致病機(jī)制　弓形蟲(chóng)的侵襲作用除與蟲(chóng)體毒力有關(guān)外，宿主的免疫狀態(tài)亦起著重要作用，因此弓形蟲(chóng)病的嚴(yán)重程度取決于寄生蟲(chóng)與宿主相互作用的結(jié)果。根據(jù)蟲(chóng)株的侵襲力、繁殖速度、包囊形成與否及對(duì)宿主的致死率等，剛地弓形蟲(chóng)可分為強(qiáng)毒和弱毒株系，目前國(guó)際上公認(rèn)的強(qiáng)毒株代表為RH株；弱毒代表為Beverley株，極大多數(shù)哺乳動(dòng)物、人及家畜家禽類(lèi)對(duì)弓形蟲(chóng)都是易感中間宿主，易感性則因種而有所差異。

速殖子期是弓形蟲(chóng)的主要致病階段，以其對(duì)宿主細(xì)胞的侵襲力和在有核細(xì)胞內(nèi)獨(dú)特的內(nèi)二芽殖法增殖破壞宿主細(xì)胞。蟲(chóng)體逸出后又重新侵入新的細(xì)胞，刺激淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)，導(dǎo)致組織的急性炎癥和壞死。電鏡下觀察到蟲(chóng)體藉尖端類(lèi)錐體和極環(huán)接觸宿主細(xì)胞膜，使細(xì)胞出現(xiàn)凹陷，蟲(chóng)體借助棒狀體分泌一種酶，稱(chēng)穿透增強(qiáng)因子（penetration 　enhancing　factor，PEF)協(xié)同蟲(chóng)體旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)穿入細(xì)胞內(nèi)發(fā)育繁殖。

包囊內(nèi)緩殖子是引起慢性感染的主要形式，包囊因緩殖子增殖而體積增大，擠壓器官，使功能受到障礙。包囊增大到一定程度，可因多種因素而破裂。游離的蟲(chóng)體可刺激機(jī)體產(chǎn)生遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)，并形成肉芽腫病變，后期的纖維鈣化灶多見(jiàn)于腦、眼部等。宿主感染弓形蟲(chóng)后，在正常情況下，可產(chǎn)生有效的保護(hù)性免疫，多數(shù)無(wú)明顯癥狀，當(dāng)宿主有免疫缺陷或免疫功能低下時(shí)才引起弓形蟲(chóng)病，即使在隱性感染，也可導(dǎo)致復(fù)發(fā)或致死的播散性感染；近幾年有報(bào)導(dǎo)艾滋病患者因患弓形蟲(chóng)腦炎而致死。

2．臨床分類(lèi)　有先天性和獲得性弓形蟲(chóng)病二類(lèi)。先天性弓形蟲(chóng)病只發(fā)生于初孕婦女，經(jīng)胎盤(pán)血流傳播。受染胎兒或嬰兒多數(shù)表現(xiàn)為隱性感染，有的出生后數(shù)月甚至數(shù)年才出現(xiàn)癥狀；也可造成孕婦流產(chǎn)、早產(chǎn)、畸胎或死產(chǎn)，尤以早孕期感染，畸胎發(fā)生率高。據(jù)研究表明，嬰兒出生時(shí)出現(xiàn)癥狀或發(fā)生畸形者病死率為12％，而存活中80％有精神發(fā)育障礙，50％有視力障礙。以腦積水、大腦鈣化灶、視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜炎和精神、運(yùn)動(dòng)的障礙為先天性弓形蟲(chóng)病典型癥侯。此外，可伴有全身性表現(xiàn)，在新生兒期即有發(fā)熱、皮疹、嘔吐、腹瀉、黃疸、肝脾腫大、貧血、心肌炎、癲癇等。融合性肺炎是常見(jiàn)的死亡原因。

獲得性弓形蟲(chóng)病可因蟲(chóng)體侵襲部位和機(jī)體反應(yīng)性而呈現(xiàn)不同的臨床表現(xiàn)。因而無(wú)特異癥狀，須與有關(guān)疾病鑒別�；颊叨鄶�(shù)與職業(yè)、生活方式、飲食習(xí)慣有一定關(guān)系。淋巴結(jié)腫大是獲得性弓形蟲(chóng)病最常見(jiàn)的臨床類(lèi)型，多見(jiàn)于頜下和頸后淋巴結(jié)。其次弓形蟲(chóng)常累及腦、眼部，引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)異常表現(xiàn)，在免疫功能低下者，常表現(xiàn)為腦炎、腦膜腦炎、癲癇和精神異常。弓形蟲(chóng)眼病的主要特征以視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜炎為多見(jiàn)，成人表現(xiàn)為視力突然下降，嬰幼兒可見(jiàn)手抓眼癥，對(duì)外界事物反應(yīng)遲鈍，也有出現(xiàn)斜視、虹膜睫狀體炎，色素膜炎等，多見(jiàn)雙側(cè)性病變，視力障礙外常伴全身反應(yīng)或多器官病損。

多數(shù)隱性感染者，當(dāng)患有惡性腫瘤，施行器官移植，長(zhǎng)期接受免疫抑制劑、放射治療、細(xì)胞毒劑等醫(yī)源性免疫受損情況下或先天性、后天性免疫缺陷者，如艾滋病患者、孕期婦女等都可使隱性感染狀態(tài)轉(zhuǎn)為急性重癥，使原有病癥惡化。據(jù)美國(guó)疾病控制中心（CDC)報(bào)告，在14510例艾滋病患者中并發(fā)弓形蟲(chóng)腦炎者有508例，大多在2～8個(gè)月內(nèi)死亡。另有資料表明在81例弓形蟲(chóng)患者中伴有何杰金氏病者32例，淋巴肉瘤9例，白血病15例。

免疫

在免疫功能健全的宿主，細(xì)胞免疫在保護(hù)性免疫中起主要作用，其中T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞及其它細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)尤起主導(dǎo)作用。被致敏的T細(xì)胞能釋放多種細(xì)胞因子，如　γ－干擾素（IFN－γ)、白介素－2（IL－2)等，參與免疫調(diào)節(jié)，激活巨細(xì)胞產(chǎn)生活性氧等從而抑制弓形蟲(chóng)速殖子在細(xì)胞內(nèi)繁殖并殺死蟲(chóng)體。

人或動(dòng)物受弓形蟲(chóng)感染后能激發(fā)特異性抗體。感染早期出現(xiàn)IgM和IgA升高，一月后為高滴度IgG所取代，并維持較長(zhǎng)時(shí)間，能通過(guò)胎盤(pán)傳至胎兒，但抗感染的免疫保護(hù)作用不明顯。近有實(shí)驗(yàn)研究證明，特異抗體與速殖子結(jié)合，在補(bǔ)體參與下可使蟲(chóng)體溶解，或促進(jìn)速殖子被巨噬細(xì)胞吞噬。

弓形蟲(chóng)在正常未被激活的巨噬細(xì)胞內(nèi)寄生時(shí)形成納蟲(chóng)泡，使蟲(chóng)體不能直接與胞內(nèi)溶酶體結(jié)合，更不能有效地觸動(dòng)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生活性氧，而使蟲(chóng)體能在細(xì)胞內(nèi)發(fā)育與增殖，此為弓形蟲(chóng)的一種免疫逃避機(jī)制。

實(shí)驗(yàn)診斷

（一)病原學(xué)檢查

具確診意義

1．涂片染色法　取急性期患者的體液、腦脊液、血液、骨髓、羊水、胸水經(jīng)離心后，沉淀物作涂片，或采用活組織穿刺物涂片，經(jīng)姬氏染色后，鏡檢弓形蟲(chóng)滋養(yǎng)體。此法簡(jiǎn)便，但陽(yáng)性率不高易漏檢。此外也可切片用免疫酶或熒光染色法，觀察特異性反應(yīng)，可提高蟲(chóng)體的檢出率。

2．動(dòng)物接種分離法　或細(xì)胞培養(yǎng)法查找滋養(yǎng)體。采用敏感的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小白鼠，樣本接種于腹腔內(nèi)，一周后剖殺取腹腔液鏡檢，陰性需盲目傳代至少3次；樣本亦可接種于離體培養(yǎng)的單層有核細(xì)胞。動(dòng)物接種和細(xì)胞培養(yǎng)是目前常用的病原查診方法。

（二)血清學(xué)試驗(yàn)

鑒于弓形蟲(chóng)病原學(xué)檢查的不足和血清學(xué)技術(shù)的進(jìn)展，血清診斷已成為當(dāng)今廣泛應(yīng)用的診斷手段。方法種類(lèi)較多，主要有：

1．染色試驗(yàn)（dye　test，DT)　為經(jīng)典的特異血清學(xué)方法，采用活滋養(yǎng)體在有致活因子的參與下與樣本內(nèi)特異性抗體作用，使蟲(chóng)體表膜破壞不為著色劑美藍(lán)所染。鏡檢見(jiàn)蟲(chóng)體不被藍(lán)染者為陽(yáng)性，蟲(chóng)體多數(shù)被藍(lán)染者為陰性。

2．間接血凝試驗(yàn)（IHA)　此法特異、靈敏、簡(jiǎn)易，適用于流行病學(xué)調(diào)查及篩查性抗體檢測(cè)，應(yīng)用廣泛。

3．間接免疫熒光接體試驗(yàn)（IFA)　以整蟲(chóng)為抗原，采用熒光標(biāo)記的二抗檢測(cè)特異抗體。此法可測(cè)同型及亞型抗體，其中測(cè)IgM適用與臨床早期診斷。

4．酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA)　用于檢測(cè)宿主的特異循環(huán)抗體或抗原，已有多種改良法廣泛用于早期急性感染和先天性弓形蟲(chóng)病的診查。

近年來(lái)將PCR及DNA探針技術(shù)應(yīng)用于檢測(cè)弓形蟲(chóng)感染，更具有靈敏、特異、早期診斷的意義。目前也開(kāi)始試用于臨床，限于實(shí)驗(yàn)室條件，國(guó)內(nèi)尚不能推廣應(yīng)用。

流行病學(xué)

1．流行概況　該病為動(dòng)物源性疾病，分布于全世界五大洲的各地區(qū)，許多哺乳動(dòng)物（約14種)、鳥(niǎo)類(lèi)是本病的重要傳染源，人群感染也相當(dāng)普遍。據(jù)血清學(xué)調(diào)查，人群抗體陽(yáng)性率為25％～50％。我國(guó)為5％～20％，多數(shù)屬隱性感染。國(guó)內(nèi)人體弓形蟲(chóng)病例，自從謝天華（1962)報(bào)告江西一側(cè)先天性腦發(fā)育不全及脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜炎的臨床病例以來(lái)，已有數(shù)十個(gè)也分離出弓形蟲(chóng)病原的病例。家畜的陽(yáng)性率可達(dá)10％～50％，常形成局部爆發(fā)流行，嚴(yán)重影響畜牧業(yè)發(fā)展，亦威脅人類(lèi)健康。造成廣泛流行的原因： ①多種生活史期都具感染性；②中間宿主廣，家畜家禽均易感；③可在終宿主與中間宿主之間、中間宿主與中間宿主之間多向交叉?zhèn)鞑�；④包囊可長(zhǎng)期生存在中間宿主組織內(nèi)；⑤卵囊排放量大，且對(duì)外環(huán)境抵御力亦強(qiáng)。

2．流行環(huán)節(jié)

⑴傳染源：動(dòng)物是本病的主要傳染源，而貓及貓科動(dòng)物則為重要傳染源。人類(lèi)只有通過(guò)垂直傳播即通過(guò)胎盤(pán)才具意義。

⑵傳播途徑：有先天性和獲得性?xún)煞N。前者指胎兒在母體經(jīng)胎盤(pán)血而感染；后者主要經(jīng)口感染，可食入未煮熟的含弓形蟲(chóng)的肉制品、蛋品、奶類(lèi)而得感染。曾有因喝生羊奶而致急性感染的報(bào)告。經(jīng)損傷的皮膚和粘膜也是一種傳染途徑，實(shí)驗(yàn)室人員需加注意。此外，接觸被卵囊污染的土壤、水源亦為重要的途徑。國(guó)外已有經(jīng)輸血、器官移植而發(fā)弓形蟲(chóng)病的報(bào)導(dǎo)。節(jié)肢動(dòng)物攜帶卵囊也具有一定的傳播意義。

⑶易感人群：人類(lèi)對(duì)弓形蟲(chóng)普遍易感，尤其是胎兒、嬰幼兒、腫瘤和艾滋病患者等m.f1411.cn/kuaiji/。長(zhǎng)期應(yīng)用免疫抑制劑及免疫缺陷者可使隱性感染復(fù)燃而出現(xiàn)癥狀。職業(yè)、生活方式、飲食習(xí)慣與弓形蟲(chóng)感染率有密切關(guān)系。

防治原則

防止弓形蟲(chóng)病流行重在預(yù)防。應(yīng)加強(qiáng)對(duì)家畜、家禽和可疑動(dòng)物的監(jiān)測(cè)和隔離；對(duì)肉類(lèi)加工廠建立必要的檢疫制度，加強(qiáng)飲食衛(wèi)生管理，教育群眾不吃生或半生的肉制品，不養(yǎng)貓養(yǎng)動(dòng)物；定期對(duì)孕婦作弓形蟲(chóng)常規(guī)檢查，以防制先天性弓形蟲(chóng)病的發(fā)生。

對(duì)急性期患者應(yīng)及時(shí)藥物治療，但至少尚無(wú)理想的特效藥物。乙胺嘧啶、磺胺類(lèi)對(duì)增殖期弓形蟲(chóng)有抑制生長(zhǎng)的作用。常用制劑為復(fù)方新諾明（co-trimoxazole)，亦可與乙胺嘧啶聯(lián)合應(yīng)用提高療效，對(duì)孕婦應(yīng)忌用，則可用螺旋霉素（spiramycin)毒性小，器官分布濃度高，為目前對(duì)孕婦的首選藥。療程中適當(dāng)配伍用免疫增強(qiáng)劑，可提高宿主的抗蟲(chóng)功能，發(fā)揮輔佐作用。