| 公開(公告)號(hào) | CN1151254C |
| 公開(公告)日 | 2004.05.26 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN01108029.9 |
| 申請(qǐng)日期 | 2001.01.08 |
| 專利名稱 | 一種防治血栓性疾病的新的蛇毒類凝血酶結(jié)構(gòu)及純化 |
| 主分類號(hào) | C12N9/74 |
| 分類號(hào) | C12N9/74;A61K38/43;A61P7/02 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國藥科大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 吳梧桐;孔毅;高向東 |
| 地址 | 210009 江蘇省南京中央路童家巷24號(hào) |
| 頒證日 | 2004.05.26 |
| 國際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 南京蘇科專利代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 周和平;徐冬濤 |
| 國省代碼 | 江蘇;32 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種源于尖吻蝮蛇的防治血栓性疾病的類凝血酶，N-末端氨基酸殘基的排列順序?yàn)镹-DSPSPWGWYDYDQYQ，由兩條相同的亞基組成，分子量為30298Da，最適pH為7.0～7.5，穩(wěn)定pH為4.0～9.0，可用主要包括依次進(jìn)行的下述柱層析方法得到：(1)DEAE柱層析，層析條件為：流動(dòng)相A為0.01～0.02mol/L，pH8.2～8.8的Tris-HCl緩沖液，B為含1mol/LNaCl的A液，流速為3ml/min，采用二元梯度洗脫，或者層析條件為：流動(dòng)相A為0.01～0.02mol/L，pH7.2～7.8的Tris-HCl緩沖液，B為含1mol/LNaCl的A液，流速為3ml/min，采用二元梯度洗脫，(2)經(jīng)Mono Q柱層析，或者SOURCE Q柱層析純化；MonoQ柱層析條件為：流動(dòng)相A為0.01～0.02mol/L，pH7.8～8.2的Tris-HCl緩沖液，B為含1mol/LNaCl的A液，流速：1ml/min，采用二元梯度洗脫，SOURCEQ柱層析條件為：流動(dòng)相A為0.01～0.02mol/L，pH7.8～8.2的Tris-HCl緩沖液，B為含0.3mol/LNaCl的A液，流速：3ml/min，采用二元梯度洗脫，(3)經(jīng)RESOURCE RPC柱純化，層析條件為：流動(dòng)相A為含0.1％TFA的水溶液，B為含0.1％TFA的乙腈溶液，流速為3ml/min采用二元梯度洗脫， |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種源于尖吻蝮蛇毒的防治血栓性疾病的新的類凝血酶(TLE)的N-端氨基酸序列及其純化方法，該酶由兩條相同的亞基組成，分子量為30298Da，最適pH為7.0～7.5，穩(wěn)定pH為4.0～9.0，其N-端15個(gè)氨基酸殘基序列為N-DSPSPWGWYDYDQYQ，能有效抑制大鼠動(dòng)脈血栓的形成，并對(duì)家兔耳緣靜脈血栓有明顯的溶栓作用。 |
| 國際公布 |
