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附子—烏頭堿、新烏頭堿和次烏頭堿的含量測定方法—HPLC-UV-3

  
方法名稱:
  附子—烏頭堿、新烏頭堿和次烏頭堿的含量測定—HPLC-UV-3
應用范圍:
  用于附子中酯型生物堿的含量測定
方法原理:
 本品用濃水浸潤,再用二氯甲烷超聲提取,經(jīng)液相色譜儀分離,在230nm處測定,按外標法計算含量。
儀器設備及實驗條件:
 

儀器設備  Waters 515高效液相色譜儀(美國);Waters 2487紫外吸收檢測器(美國)。

色譜條件   色譜柱:Alltech Apollo C18 (250mm ×4. 6mm,5μm);流動相:0~17 min,乙腈-0.1 %乙二胺(46 :54); 17~37min,乙腈-0.1 %乙二胺(82 : 18);37~50 min,乙腈-0. 1 %乙二胺(46 : 54) ;流速:1mL/ min;柱溫:30℃;檢測波長:230nm。
試樣制備:
 

對照品溶液的制備 精密稱取新烏頭堿、烏頭堿、次烏頭堿標準品適量,分別用二氯甲烷(色譜純) 定容至5mL,配置成新烏頭堿溶液(1.262×10-3mol/ L) 、烏頭堿溶液(6.504 ×10-4mol/ L) 、次烏頭堿溶液(2.174 ×10-3mol/ L),搖勻,作為對照品儲備液,分別精密吸取上述對照品儲備液(新烏頭堿2 mL 、烏頭堿2 mL 、次烏頭堿1mL) 10 mL容量瓶中,用二氯甲烷定容,配置成標準品混合液。

供試品溶液的制備   精密稱取樣品0.5g左右,置于10mL容量瓶中,滴加氨水(pH為10) 2~3 mL浸潤,再加入適量的二氯甲烷,超聲波清洗儀中超聲處理45min,用二氯甲烷定容至10mL。
操作步驟:
  分別精密量取對照品溶液和供試品溶液各10μL,注入液相色譜儀,在上述色譜條件下,測定峰面積,按外標法計算含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:m.f1411.cn)
備注:
 
參考文獻:
  項 杰,王陽雪,侯大兵等. 反相高效液相色譜法測定附子有效成分含量的方法研究. 四川大學學報(自然科學版).2006,43 (1) :165~169
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