公開(公告)號
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CN1151263C
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公開(公告)日
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2004.05.26
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申請(專利)號
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CN99811899.0
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申請日期
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1999.08.11
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專利名稱
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由細(xì)胞周期蛋白D1超量表達(dá)介導(dǎo)的真核細(xì)胞中所需蛋白的超量表達(dá)
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主分類號
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C12N15/67
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分類號
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C12N15/67;C12N5/10;//C07K14/47
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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1998.8.11 US 60/096,086; 1999.8.10 US 09/371309
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申請(專利權(quán))人
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安姆根有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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胡小芬;J·M·古達(dá)斯
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地址
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美國加利福尼亞州
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頒證日
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2004.05.26
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國際申請
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PCT/US1999/018213 1999.8.11
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進(jìn)入國家日期
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2001.04.09
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專利代理機(jī)構(gòu)
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中國專利代理(香港)有限公司
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代理人
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邰紅
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國省代碼
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美國;US
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主權(quán)項(xiàng)
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哺乳動(dòng)物細(xì)胞,包含:a)細(xì)胞周期蛋白D基因產(chǎn)物的插入基因構(gòu)建物,其中所述細(xì)胞周期蛋白D基因產(chǎn)物在細(xì)胞中被功能性地表達(dá),其表達(dá)水平高于所述細(xì)胞周期蛋白D基因產(chǎn)物在插入前細(xì)胞中的表達(dá)水平;和b)目的蛋白的插入基因構(gòu)建物,其中所述目的蛋白在所述細(xì)胞中被表達(dá),其表達(dá)水平高于所述目的蛋白在插入前細(xì)胞中的表達(dá)水平。
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摘要
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本發(fā)明涉及用于蛋白表達(dá)的真核細(xì)胞,所述真核細(xì)胞包含:(a)編碼細(xì)胞周期蛋白D基因產(chǎn)物的插入的核酸片段和(b)編碼目的蛋白的插入的核酸片段,其中所述細(xì)胞周期蛋白D基因產(chǎn)物和所述目的蛋白在所述細(xì)胞中被表達(dá)。本發(fā)明還涉及生產(chǎn)目的蛋白的方法,所述方法包括(a)將編碼細(xì)胞周期蛋白D基因產(chǎn)物的核酸和編碼目的蛋白的核酸插入到真核細(xì)胞中;和(b)在允許表達(dá)所述目的蛋白的條件下培養(yǎng)所述細(xì)胞;和(c)分離所述目的蛋白。所述細(xì)胞最好是哺乳動(dòng)物細(xì)胞,而CHO細(xì)為最優(yōu)選的。所述細(xì)胞周期蛋白D基因產(chǎn)物最好是人源的。合適的目的蛋白包括促紅細(xì)胞生成素(EPO)、骨原細(xì)胞生成素(OPG)、OPG-Fc、leptin、Fc-leptin和新紅細(xì)胞發(fā)生刺激蛋白(NESP)。
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國際公布
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WO2000/009714 英 2000.2.24
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