復(fù)方黃連素片－鹽酸小檗堿和鹽酸巴馬汀的測定－薄層掃描法

本方法采用薄層掃描法測定復(fù)方黃連素片中鹽酸小檗堿和鹽酸巴馬汀的含量。

本方法適用于中藥制劑復(fù)方黃連素片。

供試品去糖衣后的藥粉置索氏提取器中，經(jīng)甲醇加熱回流，過濾，濾液定容，制成供試液，點樣、展開，用薄層掃描儀進行掃描，于波長λ_S=430nm，λ_R=560nm測量鹽酸小檗堿和鹽酸巴馬汀吸收度積分值，計算其含量。

1.甲醇

2. 正丁醇

3. 冰醋酸

1. 儀器

1.1 索氏提取器

1.2 薄層掃描儀

1.3涂布器

應(yīng)能使吸附劑在玻璃板上手工或自動涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

1.4點樣器

一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點樣器材。

1.5展開室

可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

2.材料

2.1玻板

用20cm×10cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

2.2吸附劑

硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。

1. 對照品溶液的制備

精密稱取鹽酸小檗堿對照品適量，于25mL量瓶中，加甲醇制成1.008mg/mL的甲醇液作為鹽酸小檗堿對照品溶液。

精密稱取鹽酸巴馬汀對照品適量，于10mL量瓶中，加甲醇制成每1mL含0.534mg的甲醇液，作為鹽酸巴馬汀對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

精密稱取供試品去除糖衣后研碎的細(xì)粉（過五號篩-80目)約1g，置索氏提取器中，加甲醇回流提取至無色（約16h)，定容于100mL量瓶中，作為測定鹽酸小檗堿的供試品溶液。

另精密稱取供試品去除糖衣后研碎的細(xì)粉（過五號篩-80目)約2.5g，置索氏提取器中，加甲醇回流提取至無色（約16h)，定容于50mL量瓶中，作為測定鹽酸巴馬汀的供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

1.薄層板制備

將吸附劑1份和0.7%CMC-Na 3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進行涂布（厚度為0.5mm)取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無麻點、無氣泡、無破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用。

2.點樣

精密吸取供試品溶液和對照品溶液2μL，分別交叉點于同一硅膠G薄層板上，如用點樣器點樣到薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點直徑一般不大于2mm，點間距離可視斑點擴散情況，以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。

3.展開

將點好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，以正丁醇-冰醋酸-水（7:1:2)溶液為展開劑展開，取出薄層板，晾干。

4. 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

用定容毛細(xì)管精密吸取鹽酸小檗堿對照品溶液和鹽酸巴馬汀對照品溶液1，2，3，4，5μL，點樣，展開顯色后，掃描測定，以點樣量對積分面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。

5.含量測定

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，用雙波長進行掃描，波長：λ_S =430nm，λ_R=560nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算。

用外標(biāo)法測定時，若對照品各數(shù)據(jù)點在校正曲線上呈一通過原點的直線時，可用一點法校正，如不通過原點通常宜采用二點法校正，必要時用多點法校正。

甄漢深，陳勇，戴善光. 薄層掃描法測定復(fù)方黃連素片中鹽酸小檗堿和鹽酸巴馬汀的含量. 中國中藥雜志，1993，18（2)：96-98.