實(shí)驗(yàn)7 強(qiáng)心苷對(duì)離體蛙心的影響
[目的]
學(xué)習(xí)離體蛙心灌注法，觀察強(qiáng)心苷對(duì)離體蛙心收縮強(qiáng)度、頻率和節(jié)律的影響以及強(qiáng)心苷和鈣離子的協(xié)同作用.
[原理]
青蛙或蟾蜍等兩棲類動(dòng)物的離體心臟在一定條件下能存活較長(zhǎng)時(shí)間，適用于觀察藥物對(duì)離體心臟的作用：因強(qiáng)心苷對(duì)衰竭心臟作用明顯，可以利用低鈣降低離體蛙心的功能，以觀察藥物的作用。
[材料]
1．動(dòng)物：青蛙或蟾蜍，70g以上。
2．藥品： 任氏液；低鈣任氏液 (所含CaCl2量為—般任氏液的1／4，其他成分不變)；5％洋地黃溶液(或0.1mol／L毒K溶液);1％氯化鈣溶液
3．器材：BL—420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，手術(shù)器械，蛙板，探針，斯氏蛙心插管，
蛙心夾，雙凹夾，長(zhǎng)柄木夾，鐵支架，滴管，絲線
[方法]
1．啟動(dòng)電腦，確認(rèn)USB接口已經(jīng)連通，打開(kāi)BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)軟件，在實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的1信號(hào)通道上連接張力換能器，在“輸入信號(hào)”下拉菜單中選擇“l(fā)通道”的“張力”。
2．取蛙或蟾蜍一只，從枕骨大孔插入探針破壞大腦和脊髓，仰位固定于蛙板上；依次剪開(kāi)胸部皮膚，剪除胸部肌肉及胸骨m.f1411.cn，打開(kāi)胸腔，剪破心包膜，暴露心臟。
3．結(jié)扎右主動(dòng)脈，在主動(dòng)脈弓下穿一線，打一松結(jié)備用。在左主動(dòng)脈上朝向心端剪一“V”形口，插入盛有任氏液的蛙心插管。通過(guò)主動(dòng)脈球轉(zhuǎn)向左后方，同時(shí)用鑷子輕提動(dòng)脈球，向插管移動(dòng)的相反方向拉即可。
4．使插管尖端順利進(jìn)入心室。看到插管內(nèi)的液面隨著心臟的搏動(dòng)而上下波動(dòng)后， 將松結(jié)扎緊、固定，剪斷兩根動(dòng)脈。持插管提起心臟，用線從靜脈竇以下把其余血管一起結(jié)扎，在結(jié)扎處下方剪斷血管，使心臟離體。用滴管吸去插管內(nèi)的血液，并用任氏液連續(xù)換洗直至無(wú)血色，插管內(nèi)保留1.5ml左右的任氏液。將蛙心插管固定于鐵支架上。
5．用帶有長(zhǎng)線的蛙心夾夾住心尖，將長(zhǎng)線連于張力換能器，記錄一段正常心臟搏 動(dòng)曲線后，依次換加下列藥液。每加一種藥液后，密切注意心臟收縮強(qiáng)度、心率、房室收縮是否一致等方面的變化。
(1)換入低鈣任氏液。
(2)當(dāng)心臟收縮明顯減弱時(shí)，向插管內(nèi)加入5％洋地黃溶液(或0.1%的毒K溶液)0.2ml
(3)當(dāng)作用明顯時(shí)，再向插管內(nèi)加人1％www.med126.com的氯化鈣溶液2～3滴。
[結(jié)果]
剪貼或復(fù)制心臟的收縮曲線，圖下注明加藥、換藥、心率、房室收縮是否一致、心室體積變化等方面的說(shuō)明。分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
[注意事項(xiàng)]
1.制備標(biāo)本時(shí)，應(yīng)按指導(dǎo)試探著插管，盡量避免損傷心臟(包括靜脈竇)。
2.勿混用滴加試劑的試管；加試劑應(yīng)由少到多，作用不明顯再補(bǔ)加；加后立即用滴管攪勻，使之迅速發(fā)揮作用；出現(xiàn)明顯效應(yīng)后，應(yīng)立即吸出全部灌流液，并以新鮮任氏液換洗，直至恢復(fù)正常。
3.隨時(shí)滴加任氏液于心臟表面，使之保持濕潤(rùn)狀態(tài)。
4.固定換能器時(shí)應(yīng)稍向下傾斜，以免自心臟滴下的水流入換能器內(nèi)造成短路。
5．本實(shí)驗(yàn)以用青蛙心臟為好：因蟾蜍皮下腺體中含有強(qiáng)心苷樣物質(zhì)，其心臟對(duì)強(qiáng)心苷較不敏感。
6．開(kāi)胸不可太大，以防止腹腔內(nèi)臟翻出：
7．在剪開(kāi)左側(cè)主動(dòng)脈前，應(yīng)先用蛙心插管的細(xì)端尖置動(dòng)脈球處，與動(dòng)脈平行來(lái)選 擇適宜的剪口處，以免剪口過(guò)高或過(guò)低：
[思考]
1.保證記錄連續(xù)，及時(shí)在曲線上加以注釋，分析各現(xiàn)象產(chǎn)生分原因。
2.分析有的蛙心標(biāo)本套管內(nèi)液面升降不明顯的原因并提出相應(yīng)的對(duì)策。
3.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中套管內(nèi)液面為什么每次都應(yīng)保持一定的高度？
4.高Ca2+任氏液與腎上腺素引起的心臟活動(dòng)變化有何不同？為什么？
