生化檢驗常用的標本(specimen) 有血液、尿液、腦脊液和腹水等,其中以血液標本最為常用。
一、檢驗申請單
申請單是實驗檢查的第一步。一份完整的申請單應包含以下內容: 條碼號, 門診號,住院號;病人的姓名,性別,出生日期;病房,床位號;臨床診斷,問題或特殊檢驗注意事項;申請檢查項目;標本類型;采樣時間, 標本接收時間(年、月、日、時、分);有關治療情況(如用藥情況);醫(yī)生姓名等。其中有關的臨床和治療信息,特別是用藥信息是檢驗師評價結果的必要條件。藥物可能在體外影響分析方法或在體內引起病理變化,因而,要特別注意在申請單上提供此類信息。
二、血液標本的采集
生化檢驗用的血液標本可來自于靜脈、動脈或毛細血管。靜脈血是最常用的標本,靜脈穿刺是最常用的采血方法。毛細血管采血主要用于兒童,血氣分析多使用動脈血。
(一) 靜脈采血法
1.采血步驟
采血前核對病人姓名、性別、年齡、編號及檢驗項目等,按試驗項目要求,準備好相應的容器,如空白試管、抗凝管或促凝管等。病人應取坐位或臥位,采血部位通常是前臂肘窩的正中靜脈。若用普通采血法,采血后應取下針頭,將血液沿管壁緩慢注入試管內。
2.注意事項
(1) 防止溶血:造成溶血的因素有注射器和容器不干燥、不清潔;淤血時間過長;穿刺不順利,組織損傷過多;抽血速度太快;血液注入容器時未取下針頭或注入速度過快產生大量泡沫;震蕩過于劇烈等。若用普通注射器采血后,未取針頭直接將血注入真空管內,也易造成溶血。體內溶血屬合格標本,但應在報告單上注明。
(2) 避免充血和血液濃縮:采血時應動作迅速,盡可能縮短止血帶使用時間。用止血帶壓迫時間最好不超過半分鐘,否則將使生化結果升高或下降。
(3) 若病人正在進行靜脈輸液,不宜在輸液同側手臂采血;若女性病人做了乳腺切除術,應在手術對側手臂采血。
(4) 采血的體位:體位改變可引起一系列的生理變化,使血液中的許多指標發(fā)生改變。一般采取直立位采血,其二標本的測定值比臥位高5 %~15 %。因此,采血時要注意保持正確的體位(坐位或臥位),以及體位的一致性。
(5) 采血時只能向外抽,決不能向靜脈內推,以免注入空氣,形成氣栓而造成嚴重后果。
(6) 很多生化成分受膳食影響,因此,采血前要確認病人是否空腹。
(二) 動脈采血法
肱動脈、股動脈、橈動脈以及其它任何部位的動脈都可以作為采血點,但多選擇肱動脈和橈動脈。在摸到明顯搏動處,按常規(guī)消毒,左手固定搏動處,右手持注射器,針頭成60°角刺入,血液將自動進入注射器內。采血注意事項見血氣分析部分。
(三) 真空采血法
雙向針的一端插入真空試管內,另一端在持針器的幫助下刺入靜脈,血液在負壓作用下自動流入試管內。由于在完全封閉狀態(tài)下采血,避免了血液外溢引起的污染,并有利于標本的轉運和保存。標準真空采血管采用國際通用的頭蓋和標簽顏色顯示采血管內添加劑種類和試驗用途。可根據需要選擇相應的盛血試管。
1.普通血清管
紅色頭蓋,采血管內不含添加劑,用于常規(guī)血清生化、血庫和血清學相關檢驗。
2.快速血清管
橘紅色頭蓋,采血管內有促凝劑,可激活纖維蛋白酶,使可溶性纖維蛋白變?yōu)椴豢扇艿睦w維蛋白多聚體,進而形成穩(wěn)定的纖維蛋白凝塊?焖傺骞芸稍5 分鐘內使采集的血液凝固,適用于急診血清生化試驗。
3.惰性分離膠促凝管
金黃頭蓋,采血管內添加有惰性分離膠和促凝劑。標本離心后,惰性分離膠能夠將血液中的液體成分(血清或血漿) 和固體成分(紅細胞、白細胞、血小板、纖維蛋白等)徹底分開并完全積聚在試管中央而形成屏障,標本在48 小時內保持穩(wěn)定。促凝劑可快速激活凝血機制,加速凝血過程,適用于急診血清生化試驗。
4.肝素抗凝管
綠色頭蓋,采血管內添加有肝素。肝素直接具有抗凝血酶的作用,可延長標本凝血時間。適用于紅細胞脆性試驗、血氣分析、紅細胞壓積試驗、血沉及普通生化測定,不適于做血凝試驗。過量的肝素會引起白細胞的聚集,不能用于白細胞計數。因其可使血片染色后背景呈淡藍色,故也不適于白細胞分類。
5.血漿分離管
淺綠色頭蓋,在惰性分離膠管內加入肝素鋰抗凝劑,可達到快速分離血漿的目的,是電解質檢測的最佳選擇,也可用于常規(guī)血漿生化測定和IC U 等急診血漿生化檢測。血漿標本可直接上機并在冷藏狀態(tài)下保持48 小時穩(wěn)定。
6.E DT A 抗凝管
紫色頭蓋,乙二胺四乙酸(E DT A ,分子量292) 及其鹽是一種氨基多羧基酸,可以有效地螯合血液標本中的鈣離子。螯合鈣或將鈣從反應位點移去將阻滯和終止內源性或外源性凝血過程,從而防止血液標本凝固。適用于一般血液學檢驗,不適用于凝血試驗及血小板功能檢查,亦不適用于鈣離子、鉀離子、鈉離子、鐵離子、堿性磷酸酶、肌酸激酶和亮氨酸氨基肽酶的測定及PCR 試驗。
7.枸櫞酸鈉凝血試驗管
淺藍頭蓋,枸櫞酸鈉主要通過與醫(yī)師招聘血樣中鈣離子螯合而起抗凝作用。適用于凝血實驗,國家臨床實驗室標準化委員會(national com mittee forclinical laboratory standards ,NCCLS)推薦的抗凝劑濃度是3.2 %或3.8 % (相當于0.109 或0.129 mol/L),抗凝劑與血液的比例是1∶9。
8.枸櫞酸鈉血沉試驗管
黑色頭蓋,血沉試驗要求的構櫞酸鈉濃度是3.2 % (相當于0.109 mol/L),抗凝劑與血液的比例為1∶4 。
9.草酸鉀/氟化鈉
灰色頭蓋。氟化鈉是一種弱效抗凝劑,一般常同草酸鉀或乙碘酸鈉合并使用,其比例為氟化鈉1 份,草酸鉀3 份。此混合物4 mg 可使1 ml 血液在23 天內不凝固和抑制糖分解,它是血糖測定的優(yōu)良保存劑,不能用于尿素酶法測定尿素,也不能用于堿性磷酸酶和淀粉酶的測定,推薦用于血糖檢測。