采用間接ELISA方法檢測胃十二指腸疾病患者血清中抗幽門螺桿菌（Hp)抗體IgG，以檢測各型胃、十二指腸疾病患者的Hp感染情況，并對檢測結(jié)果與細菌培養(yǎng)和/或涂片（培養(yǎng)30例，涂片48例)進行分析對比。本文探討了胃炎、胃及十二指腸潰瘍病患者血清抗Hp抗體IgG測定的臨床應(yīng)用價值。
1 對象和方法
1.1 對象
淺表性胃炎患者17例，萎縮性胃炎患者8例，胃潰瘍患者14例，十二指腸球潰瘍患者12例。全部病例均經(jīng)臨床、病理診斷確診。血液標本采取后立即分離出血清置－20℃凍存?zhèn)錂z。
1.2 方法
抗Hp抗體IgG檢測用ELISA試劑。所用包被用Hp抗原、正常陰性對照血清、辣根過氧化酶標記的羊抗人IgG結(jié)合物均由上海第二醫(yī)科大學(xué)提供。采用ELISA間接法，按提供試劑單位制定的抗Hp抗體IgG檢測程序進行。方法簡述如下：用10μg/ml的抗原（多株Hp超聲粉碎物)包被聚苯乙烯反應(yīng)板，0.1ml/孔，4℃過夜。用10％牛血清磷酸緩沖液（pH7.4)封閉37℃1h。加待檢樣品為稀釋度1：200的病人血清，37℃結(jié)合2h。加辣根過氧化酶標記的羊抗人IgG抗體37℃孵育。最后加鄰苯二胺作基質(zhì)，2M硫酸手反應(yīng)終止劑。每加一層試劑時用0.05％PBSTWeen20（pH7.4)洗滌3次。顯色后用DG—3022型酶聯(lián)儀在490nm波長測定OD值，標本OD值與血清中抗體IgG量呈正相關(guān)，以標本OD值比陰性對照OD值（每板設(shè)兩孔以上，取平均值)，大于1.70者為血清抗Hp抗體IgG陽性。
2 結(jié)果
淺表性胃炎17例中，血清抗Hp抗體IgG陽性12例（70.6％)，萎縮性胃炎8例中，陽性5例（62.5％)，胃潰瘍14例中，陽性12例（85.7％)，十二指腸球潰瘍12例中，陽性11例（91.7％)。本組51例中ELISA法檢測陽性40例（78.4％)，培養(yǎng)和/或涂片檢測陽性39例（76.5％)，二者無明顯差異（P＞0.05)。
2 討論
至今為止，慢性胃、十二指腸疾患的病理機制尚未完全明確�，F(xiàn)在多數(shù)學(xué)者認為幽門螺桿菌的感染與慢性胃炎、胃及十二指腸潰瘍的發(fā)病有關(guān)。Hp的致病性存在于：①Hp能分泌尿素酶，將尿素分解為氨；氨對粘膜具有毒性。②Hp細胞毒，能使胃粘膜上皮細胞空泡變性。③Hp與胃上皮有特別親和力，粘附于細胞表面。④Hp尿素酶，可破壞胃粘液，導(dǎo)致粘液性改變，H+反彌散。⑤Hp分泌脂酶A，能分解膽鹽，后者對胃粘膜有毒性。⑥Hp內(nèi)毒素。⑦Hp感染致使胃體部腺粘膜PAS—AB陽性物質(zhì)減少，尤以幽門腺區(qū)域的粘膜表層細胞內(nèi)粘蛋白降低為顯著，致粘膜防御機制減弱，從而有引起胃潰瘍的可能性。上述原因可異致灶部粘膜炎細胞浸潤、粘膜上皮細胞水腫、充血、粘液增多變性；還可伴有血及糜爛，從而引起炎癥及潰瘍。
國外已有報道血清抗Hp抗體的IgG的測定結(jié)果與Hp菌的粘膜檢出結(jié)果間有很好的相關(guān)一致性。本文檢出結(jié)果與上述報道一致。血清抗Hp抗體IgG的測定是判斷胃炎、消化性潰瘍疾患者有無Hp感染的良好指標。已有報道表明血清抗Hp抗體IgG當(dāng)Hp清除后可以轉(zhuǎn)陰。本文測定結(jié)果表明，ELISA法測定血清抗Hp抗體IgG結(jié)果與粘膜活檢的細菌培養(yǎng)和/或涂片結(jié)果之間無顯著差異，且方法簡便，不需做胃鏡檢查。血清抗Hp抗體IgG測定對臨床診斷有無Hp感染及胃、十二指腸疾患者抗菌藥物的使用、療效觀察有一定的臨床價值。
仉紅剛 劉瓊蔚
天津市河西醫(yī)院血研室（天津 300202)
