幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)為人類慢性胃炎和消化性潰瘍的重要致病因子,人血清中特異性抗HpIgG抗體水平能很好地反映Hp的感染情況,血清學診斷方法已引人們的高度重視,由于Hp全菌抗原與空腸彎曲菌等存在交叉反應(yīng),有必要對Hp特異性抗原進行純化后使用,大量研究表明Hp尿素酶為一種理想的Hp特異性抗原成分。
我們在國內(nèi)外首次應(yīng)用Sephadex G200柱從Hp超聲波破碎物離心上清中,一次性提純了Hp尿素酶抗原,SDS—PAGE分析結(jié)果表明,所提取的Hp尿素酶抗原中僅含有66000及30000兩種蛋白成分,與Hp尿素酶蛋白兩種亞基的大小完全相同,提取物中幾乎不含有其它雜蛋白成分。經(jīng)Western blot分析證明所提純的Hp尿素酶抗原仍具有良好的抗原性。與國外報道中使用的Sephacryl S400、Bio-geP100、Superose 12HR10/30柱提取Hp尿素酶以及正辛基葡萄糖粗提后,用agaroseA-5m柱提純Hp菌的HM-CAP(內(nèi)含Hp尿素酶)相比,簡化了分離程序,隆低了成本,同時提高了分離純度和回收率,我們認為Sephadex G200是用于尿素酶抗原提純化方法的改進。上述Hp尿素酶抗原用ELISA法進行測定,經(jīng)臨床驗證,有很高的敏感性、特異性和實用價值,這將有利于推動Hp血清學檢查方法的普及應(yīng)用。
陳晶晶 張建中 蔣秀高
中國預防醫(yī)學科學院流行病學微生物學研究所(北京102206)