病毒感染的實驗室檢查包括病毒分離與鑒定、病毒核酸與抗原的直接檢出以及特異性抗體的檢測。臨床醫(yī)師根據流行病學資料,疾病的癥狀與體征綜合判斷可能為何種病毒感染,留取適宜的標本送檢。
一、檢材的采集與送檢
病毒性疾病通常采集血液、鼻咽分泌液、咯痰、糞便、腦脊液、皰疹內容物、活檢組織或尸檢組織等。
供分離病毒、檢出核酸及抗原的標本的,要求:
。ㄒ)盡早采取在發(fā)病初期(急性期)采取,較易檢出病毒,越遲陽性率越低。
。ǘ)部位適宜由感染部位采取,如呼吸道感染采取鼻咽洗漱液或咯痰;腸道感染采取糞便;腦內感染采取腦脊液;皮膚感染采取病灶組織;有病毒血癥時采取血液。
。ㄈ)冷藏速送病毒離活體后在室溫下很易死亡,故采得檢材應盡快送檢。若距離實驗室較遠,應將檢材放入裝有冰塊或干冰的空器內送檢。病變組織則應保存于50%的甘油緩沖鹽水中。污染檢材,如鼻咽分泌液、糞便等應加入青霉素、鏈霉素或慶大毒素等,以免雜菌污染細胞或雞胚,而影響病毒分離。
檢測特異性抗體需要采取急性期與恢復期雙份血清,第一份盡可能在發(fā)病后立即采取,第二份在發(fā)病后2~3周采取。血清標本放4℃-20℃保存,試驗前血清標本以56℃30分鐘處理去除非特異性物質及補體。無菌性腦炎患者也可取腦脊液檢測特異性lgM。
表23-1 病毒檢材采集與檢驗結果的關系
采取標本的時期 |
檢查病毒及其成分 |
測定抗體 |
潛伏期及前驅期 剛發(fā)病或急性期 恢復期及康復期 |
較難查見 最多查見 很難查見 |
未增多
未增多或增多不明顯 明顯增多(常超過4倍) |
表23-2 供病毒分離的檢材
臨床表現 |
常見病毒 | 幫助診斷有用的檢材 |
呼吸道感染 |
腺病毒
巨細胞病毒 流感病毒 副流感病毒 呼腸孤病毒 合胞病毒 |
咽試、肛拭
咽試或含漱液、尿液 咽拭或含漱液 咽拭含漱液 咽拭、糞便或肛拭 咽拭或含漱液、鼻咽洗液 |
出疹疾病 | 柯薩奇病毒
巨細胞病毒 ?刹《 EB病毒 單純皰疹病毒 麻疹病毒 風疹病毒 |
糞便或肛拭、咽拭
咽拭或含漱液、尿液 糞便或肛拭、咽拭 咽拭或含漱液 病灶棉拭或吸取液、咽拭 咽拭或含漱液、尿液 咽洗液、鼻咽拭 病灶棉拭或吸取液、咽拭 |
腦炎 | 蟲媒病毒
單純皰疹病毒 麻疹病毒 脊髓灰質炎病毒 |
血液、腦脊液
腦活檢、腦脊液、皰疹棉拭或吸取液 腦脊液、咽拭或含漱液、尿液 糞便或肛拭、咽拭、腦脊液 |
無菌性腦膜炎 | 柯薩奇病毒
?刹《 腮腺炎病毒 |
腦脊髓液、糞便或肛拭、咽拭
腦脊液、糞便或肛拭、咽拭 腦脊髓液、口頰粘膜棉拭 |
失天或新生兒感染 | 巨細胞病毒
風疹病毒 單純皰疹病毒 |
尿液、咽拭或含漱液
咽拭或含漱液、尿液 病灶棉拭或吸取液、回拭 |
眼部感染 | 腺病毒
單純皰疹病毒 |
結膜棉拭、咽拭、肛拭
結膜棉拭、病灶棉拭或吸取液、咽拭 |
其它感染
巨細胞包涵體疾病 單核細胞增多綜合征 |
巨細胞病毒
巨細胞病毒 EB病毒 柯薩奇B病毒 ?刹《 |
尿液、咽拭
尿液、咽拭 咽拭或洗液 心包液、糞便、咽拭 心包液、糞便、咽拭 |
二、病毒的分離與鑒定
。ㄒ)病毒的分離
病毒分離的一般程序是:
檢驗標本→殺滅雜菌(青、鏈霉素)→接種 | 易感的動物→出現病狀
雞胚→病變或死亡 細胞培養(yǎng)→細胞病變 |
→鑒定病毒種型(血清學方法) |
無菌標本(腦脊液、血液、血漿、血清)可直接接種細胞、動物、雞胚;無菌組織塊經培養(yǎng)液洗液洗滌后制成10~20%懸液離心后,取上清接種;咽洗液、糞便、尿、感染組織或昆蟲等污染標本在接種前先用抗生素處理,殺死雜菌。