近年來國內(nèi)外許多學(xué)者認(rèn)為幽門螺桿菌(簡稱Hp)和彎曲菌樣細(xì)菌(簡稱CLOs)與胃炎和消化性潰瘍的發(fā)病密切相關(guān)。為觀察上述關(guān)系,我室1987-03-02自本校兩所附屬醫(yī)院收集因胃十二指腸潰瘍和胃癌施行胃切除手術(shù)標(biāo)本84份,進行上述兩類細(xì)菌的檢測。
1 對象和方法
1.1 對象
全組84例,男76例,女8例;年齡29歲~68歲;病程1月~38a。手術(shù)切除標(biāo)本均經(jīng)病理證實,胃潰瘍27例,18例并胃粘膜慢性炎癥;十二指腸潰瘍17例,11例并胃粘膜慢性炎癥;復(fù)合潰瘍8例,3例并慢性胃炎;胃體癌25例,4例并慢胃炎;賁門癌7例。32例術(shù)前使用過不同種類的抗菌藥物:青、鏈、慶、卡、滅滴靈及痢特靈。無菌,剪取手術(shù)切下的胃大部組織中的胃體、胃竇及十二指腸球部粘膜各一塊,約1cm×1cm~1.5cm,pH7.4的PBC緩沖液1ml~2ml輸送瓶內(nèi),微氧條件下,1h內(nèi)送實驗室檢查,胃腔pH值采用pH試紙法測定。
1.2 方法
直接涂片鏡檢:將胃體、竇及十二指腸球部膜分別剪成碎塊置pH7.4組織勻漿器中研磨成漿,取少量該勻漿涂布在載玻片上,固定,革蘭染色,鏡檢,見革蘭陰性呈螺旋狀或呈海鷗狀細(xì)菌為鏡檢陽性,反之為陰性。
分離培養(yǎng):在制備直接涂片的同時,取上述組織勻漿0.5ml,接種在Skirrow選擇培養(yǎng)基上(含萬古霉素10ml/L,多粘菌素B250IU/L,TMP5ml/L),置微氧環(huán)境(O22.2%,N287.8%,CO210%)。35℃~37℃培養(yǎng)48h~72h后分離,無生長者繼續(xù)培養(yǎng)2d~3d再分離,培養(yǎng)1周仍無生長者為培養(yǎng)陰性。據(jù)其在微氧環(huán)境,Skim.f1411.cn/zhicheng/rrow培養(yǎng)基生長而在厭氧、需氧環(huán)境均不生長的特點,及典型細(xì)菌形態(tài)和生化反應(yīng)結(jié)果作出初步判斷。最后鑒定尿素酶(-)者為CLOS,尿素酶(+)為Hp(尿素酶試驗以試管法為準(zhǔn))。
2 結(jié)果
2.1 細(xì)菌檢出情況見表1,2,3。胃粘膜表面pH值范圍2~9。
表1 Hp/CLOs-2在消化性潰瘍和胃癌中的檢出率
病名 | 直接涂片鏡檢陽性率(檢出數(shù)/例) | 細(xì)菌培養(yǎng)陽性率(檢出數(shù)/率) |
消化性潰瘍 | 88.5(46/52) | 82.9(29/35) |
胃潰瘍 | 88.9(24/27) | 88.2(15/17) |
十二指腸潰瘍 | 94.1(16/17) | 81.8(9/11) |
復(fù)合潰瘍 | 75.0(6/8) | 71.4(5/7) |
胃癌 | 68.8(22/32) | 57.1(12/21) |
胃體癌 | 72.0(18/25) | 64.7(11/17) |
賁門癌 | 57.1(4/7) | 25.0(1/4) |
2.2 病理特點
病理觀察發(fā)現(xiàn)在慢性淺表性胃炎的粘膜組織中,常見有彎曲菌寄生,數(shù)量隨炎癥加重相應(yīng)增多,且呈叢狀分布。細(xì)菌不但在竇部寄生,同樣炎癥波及體部時,體部粘膜亦有彎曲菌存在。個別粘膜正常也能檢出極少量的彎曲菌,多單獨存在。慢性萎縮性胃炎樟明顯腸腺化生時,細(xì)菌量明顯減少,多呈散在、單獨分布。細(xì)菌多存在上皮層表面,尤其在胃小凹處更為明顯。
表2 Hp/CLOs-2在不同疾病的檢出情況
病 名 | Hp | CLOs-2 | Hp+CLOs-2 |
胃潰瘍 | 7 | 4 | 5 |
十二指腸潰瘍 | 8 | 1 | |
復(fù)合潰瘍 | 3 | 2 | |
胃體癌 | 6 | 3 | 2 |
賁門癌 | 1 | ||
合 計 | 25 | 9 | 8 |
表3 胃十二指腸粘膜Hp/CLOs-2檢出情況
胃體 | 胃竇 | 球部 | |
涂片陽性率(%) | 69.1 (58/84) | 71.65 (58/81) | 5.6 (40/72) |
培養(yǎng)陽性率(%) | |||
CLOs-2 | 25.0 (10/40) | 12.5 (5/40) | 13.9 (5/36) |
Hp | 57.5 (23/40) | 67.5 (27/40) | 50.0 (18/36) |
3 討論
近10年,國內(nèi)外有關(guān)這方面的文獻報道不少。Hp和CLOs胃潰瘍檢出率為57%~85%,十二指腸潰瘍?yōu)?0%~100%,胃癌為19%~25%。提出上述兩類細(xì)菌可能是慢性胃炎及消化潰瘍的病原菌,尤其與十二指腸潰瘍關(guān)系更為密切。而與胃癌的發(fā)病無直接關(guān)系。我室檢測結(jié)果顯示胃潰瘍、十二指腸潰瘍及復(fù)合潰瘍?nèi)叩臋z出率無統(tǒng)計學(xué)上的差異。胃癌的檢出率為68.8%,明顯高于文獻報道。胃體與賁門間檢出率差異無顯著性。消化性潰瘍檢出率高于胃癌檢了率則有統(tǒng)計學(xué)上的意義。
42例陽性檢出病例中,單純Hp感染占首位,以竇部檢出機會較多,多見于十二指腸潰瘍。其次是單純CLOs感染和混合感染。混合感染表現(xiàn)為不同部位的胃粘膜分別寄生著不同m.f1411.cn的彎曲菌,以胃潰瘍病例檢出較高。組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)這類細(xì)菌多成叢寄生在胃粘膜上皮細(xì)胞表面,尤其在胃小凹處。被寄生的粘膜細(xì)菌呈特有炎性改變,未被寄生者則正常或基本正常。因此,增加受檢部位,可提高陽性檢出率。病變早期若給適當(dāng)抗生素治療,隨細(xì)菌殺滅,炎性粘膜可逐步修復(fù)正常,但仍有復(fù)發(fā)的可能。Glupczynski等觀察,口服羥氨芐青霉素治療急性胃炎有效,但停藥后1個月,100%病例彎曲菌再現(xiàn),胃炎復(fù)發(fā)。
彎曲菌的感染不受胃腔pH值的影響,本文陽性檢出病例中,胃腔內(nèi)pH為2~9?赡苁沁@類細(xì)菌主要寄生于覆蓋在胃粘膜上的粘液層與胃上皮細(xì)菌之間,盡管胃腔內(nèi)pH變化很大,但該層pH值通常保持在7.0左右。張振華等用透射電鏡觀察在壁細(xì)胞泌酸小管內(nèi)可見到幽門彎曲菌CLOs,指出該菌有耐酸力。
現(xiàn)已證明這兩類細(xì)菌非人類共生菌。人類胃粘膜上的彎曲菌來源問題至今仍不清楚,有文獻提示在某些物胃粘膜上也能檢出這類細(xì)菌。人體內(nèi)彎曲菌是否來源于動物,有待進一步探討。