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中國幽門螺桿菌研究:ELISA法檢測幽門螺桿菌抗體的臨床意義

本研究用間接ELISA法檢例患者和健康輸血員血清中抗HpIgA、IgG同時還檢測了胃粘膜中的Hp,以探討Hp抗體測定的臨床意義。1 材料和方法1.1 材料本組217例患者經胃鏡及胃粘膜組織學診斷為十二指腸球部潰瘍(DU)48例,胃潰瘍(GU)27例,慢性萎縮性胃炎(CAG)18例,慢性清…

本研究用間接ELISA法檢例患者和健康輸血員血清中抗HpIgA、IgG同時還檢測了胃粘膜中的Hp,以探討Hp抗體測定的臨床意義。

1 材料和方法

1.1 材料

本組217例患者經胃鏡及胃粘膜組織學診斷為十二指腸球部潰瘍(DU)48例,胃潰瘍(GU)27例,慢性萎縮性胃炎(CAG)18例,慢性清表性胃炎(CSG)96例,復合性潰瘍(CU)7例,胃癌(GCa)14例,胃粘膜正常2例。慢性胃炎中活動性胃炎(ACG)54例,非活動性(NACG)60例。所有患者均抽取空腹靜脈血,此外還收集了80例健康輸血員血清測抗HpIgA、IgG。

1.2 方法

①胃粘膜內Hp菌檢測活檢粘膜直接涂片檢查及Hp的分離培養(yǎng)鑒定均參照張振華所報道的方法。②ELISA方法:從患者胃粘膜中培養(yǎng)出的7株Hp菌分離純化,超聲粉碎后在4℃下1500g離心30min,取上清蛋白定量后作抗原。用50mg/ml的抗原包被聚苯乙稀反應板,用間接ELISA法測定,每板均設標準陽性和陰性對照,將兩者OD值用作為質控,每板此值之差在±0.5范圍內。結果用特測標本OD值與標準陽性OD值之比來表示,該比值在血清IgA≥0.6,在IgG≥0.5為陽性,在胃液IgA≥0.145為陽性。③吸收抑制試驗:用7例在ELISA試驗中高效價IgA、IgG的Hp感染者的血清混合后從1:10開始對倍稀釋至1:160,然后分別用Hp、空腸彎曲菌(CJ)及大腸桿菌完整的細菌和Hp抗原吸收后,按上述方法做ELISA。

計數(shù)資料用卡方檢驗,計量資料用t檢驗。

2 結果

Hp陽性患者血清中抗HpIgA、IgG含量均顯著高于Hp陰性者(P<0.01)。與細菌學比較其敏感性分別為92.1%和95.7%,特異性分別為91.1%和88.5%,符合率分別為71.7%和93.2%(表1)?梢钥闯霾煌膊≈g的血清抗HpIgA和LgG含量有顯著差異(P<0.01),兩組比較發(fā)現(xiàn)血清IgA含量在ACG組顯著高于除CU外的其它各組(P<0.05,P<0.01),消化性潰瘍各組顯著高于NACG組(P<0.01),2例組織學正常者IgA、IgG分別為0.44和0.37,80例健康輸血員血清抗HpIgA,IgG的含量和陽性率均顯著低于ACG,GU,DU及GCa組(P<0.01,P<0.05)。研究表明,血清Hp抗體與胃炎的嚴重程度有關,中重度胃炎血清抗HpIgA,IgG的陽性率為82.4%和79.0%,顯著高于輕度胃炎的45.6%59.7%(P<0.01,P<0.05)。但Hp抗體含量和陽性率在淺表性胃炎和萎縮性胃炎之間無顯著差異(P<0.05表2)。

表1 胃粘膜內Hp和血清Hp抗體的比較

胃粘膜HpnIgAIgG
X±S陽性數(shù)(%)X±S陽性數(shù)(%)
陽性1390.79(0.19)128(92.1)0.65(0.13)133(95.7)
陰性780.50(0.1)7(9.0)0.45(0.13)9(11.5)

表2 各種胃部疾病血清抗HpgA,IgG比較

病 種nIgAIgG
X±S陽性數(shù)(%)X±S陽性數(shù)(%)
ACG540.82(0.2)49(90.7)0.69(0.1)51(94.4)
NGCG600.53(0.2)22(36.7)0.47(0.1)23(38.3)
GU270.71(0.2)19(70.7)0.59(0.2)20(74.1)
DU480.71(0.2)31(64.6)0.57(0.2)34(70.8)
CU70.86(0.4)5(71.2)0.58(0.1)5(71.2)
GCa140.68(0.2)8(57.1)m.f1411.cn/shouyi/0.55(0.1)8(57.1)
RG50.54(0.1)120.00.52(0.2)1(20.0)
輸血員800.47(0.2)27(33.8)0.43(0.2)25(31.3)

Hp陽性患者胃液中抗HpIgA顯著高于Hp陰性者(P<0.01),與細菌學結果比較敏感性,特異性與符合率分別為96.4%92.9%和95.3%(表3)。

表3 胃粘膜內Hp的檢出率和胃液抗HpIgA的比較

胃粘膜nX±S陽性數(shù)
陽性570.438(0.234)55(96.5)
陰性280.101(0.045)2(7.1)

不同疾病之間胃液抗HpIgA含量有顯著差異(表4,P<0.01),兩組比較發(fā)現(xiàn)ACG組、消化性潰瘍各組和CGa組顯著高于NACG組(P<0.05)。此外中重度胃炎胃液抗HpIgA的陽性率為76.6%,顯著高于累度胃炎的40.0%(P<0.05)。

表4 各種胃部疾病胃液抗HpIgA結果

病種nX±S陽性數(shù)(%)
ACG240.497(0.252)22(91.7)
NACG210.162(0.161)7(33.3)
GU150.281(0.212)10(66.7)
DU150.269(0.208)12(80.0)
CU30.567(0.298)2(66.7)
GCa50.502(0.159)4(80.0)

無論是完整的Hp菌還是超聲粉碎提取的Hp抗原與Hp陽性血清共同溫育后都能使血清中抗HpIgA和IgG效價明顯下降,而用大腸桿菌和Cj吸收后的血清抗體僅有少許下降,此結果證明本試驗具有特異性。

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)Hp陽性者血清抗HpIgA,IgG的陽性率顯著高于Hp陰性者。與細菌學檢查比較其敏感性、特異性和符合率高達95%~88%,與國外文獻報道相似。吸收抑制試驗證實本研究所用ELISA法測得的血清Hp抗體可定為特異的針對Hp的免疫反應。因此,ELISA陽性結果強有力支持Hp感染。本研究表明,血清中抗HpIgA、IgG密切反映了消化性潰瘍的存在和胃炎的組織學變化。血清Hp抗體在ACG組的陽性率達90%以上,在消化性潰瘍?yōu)?7%和71%,而在NACG中為36%和38%。健康輸血員血清中抗Hp抗體顯著低于消化性潰瘍和慢性胃炎。此外,中重度胃炎血清中Hp抗m.f1411.cn/pharm/體的含量和陽性率顯著高于輕度胃炎。上述結果表明Hp的血清檢測可用來診斷Hp感染和用作篩選胃鏡檢查患者,這將有助于那些不宜做胃鏡檢查患者的診斷,并可用于Hp感染的流行病學調查及評價和追蹤抗Hp治療效果。

Hp寄居不但可引起宿主的全身免疫反應,而且引起胃腸道的局部免疫反應。本研究顯示,Hp陽性者胃液中抗HpIgA顯著高于Hp陰性者,與細菌學比較其敏感性、特異性和符合率高達96%至92%,高于國外文獻報道。本研究結果還表明,胃液中抗HpIgA與消化性潰瘍及胃炎的存在和組織變化密切相關。ACG組及消化性潰瘍各組陽性率顯著高于NACG組,中重度胃炎顯著高于輕度胃炎。局部分泌性IgA的確切作用尚不清楚。本研究胃液內抗HpIgA檢測的敏感性、特異性均高于血清學試驗,這說明局部免疫反應與Hp感染的關系比全身免疫反應更為密切,故檢測胃液內抗HpIgA可作為血清學試驗的補充,兩者結合可進一步提高Hp感染的免疫學診斷準確性。

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