1 試劑
1.1 無水吡啶
取吡啶200ml，置干燥的蒸餾瓶中，加苯40ml，加熱蒸餾，收集114～116℃蒸餾出的吡啶，含水量應(yīng)在0.1%以下。
1.2 無水甲醇
取甲醇1000ml，于干燥蒸餾瓶中，加金屬鎂約15g與二氯化汞0.4g（或碘0.5g)回流2～4小時，然后蒸餾（蒸餾儀器均需干燥)，收集64～65℃蒸餾出的甲醇，含水量www.med126.com應(yīng)在0.05%以下。
1.3 二氧化硫
工業(yè)用，如無二氧化硫可用硫酸及亞硫酸鈉配制。
Na2SO3+H2SO4→Na2SO4+H2SO3
H2SO3→H2O+SO2
按此反應(yīng)根據(jù)SO2之需要量計算亞硫酸鈉及硫酸之用量，將亞硫酸鈉置于瓶中，加少量水，緩緩加入硫酸，將生成之二氧化硫通過濃硫酸洗氣瓶，再通入費休氏試劑瓶中。
1.4 費休氏試劑
取干燥的1000ml玻璃容器，加入碘42.33g與無水吡啶133.3ml，加塞，振搖至碘全部溶解后，加無水甲醇333.3ml，稱定重量，將此瓶置冰浴中，用密閉裝置導(dǎo)入經(jīng)濃硫酸洗氣瓶脫水的二氧化硫直至重量增加32g為止，密封避光保存。
1.5 標(biāo)準(zhǔn)水的制備與標(biāo)化
1.5.1 制備
于干燥無水的50ml容量瓶中，精密稱取0.4g左右雙蒸水，用無水甲醇稀釋至刻度，密封保存。
1.5.2 標(biāo)化
精密量取標(biāo)準(zhǔn)水1ml與制備標(biāo)準(zhǔn)水用的無水甲醇5ml分別置于干燥帶塞的玻瓶中，用費休氏試劑滴定至溶液呈棕黃色。
1.5.3 計算
稱取水重為Amg。
1ml標(biāo)準(zhǔn)水所需費休氏試劑為Bml。
5ml無水甲醇所需費休氏試劑為Cml。
每ml費休氏試劑相當(dāng)于水的mg數(shù)為N=A/50 / B-C/5
1ml標(biāo)準(zhǔn)水之含水量（mg)=N×B
2 操作
2.1 精密稱取干燥制品0.1～0.5g于干燥帶塞的玻瓶中，加無水甲醇5ml（按取樣量情況可酌情減少甲醇加量)m.f1411.cn/rencai/，不斷振搖，用費休氏試劑滴定至棕黃色，經(jīng)振搖1分鐘不退色，即為終點。同時取無水甲醇5ml作空白試驗。
2.2 費休氏試劑標(biāo)化
精密量取標(biāo)準(zhǔn)水1ml于干燥帶塞的玻瓶中，用費休氏試劑滴定至終點。
1ml標(biāo)準(zhǔn)水含水量（mg)
費休氏試劑效價N= ────────────
費休氏試劑滴定數(shù)
3 計算
（樣品滴定數(shù)-空白滴定數(shù))×N1
樣品水分含量%（g/g)= ────────────────×──
樣品重量 10
附注
1．配制試劑及測定樣品用的全部儀器均應(yīng)干燥至無水。
2．布氏菌病活菌苗及鼠疫活菌苗等制品能在費休氏試劑中溶解，可不用加無水甲醇提取。
3．空氣中濕度大，對水分測定有影響，取樣時應(yīng)備有防濕裝置。相對濕度應(yīng)30%以下。
4．有條件可采用卡氏水分測定儀測定。
5．如樣品中含有干擾物質(zhì)，可采用五氧化二磷真空低溫干燥法測定。
5.1 試劑
五氧化二磷（工業(yè)用)。
5.2 操作
取制品0.2～1.0g置于已干燥至恒重的稱量瓶中，加蓋，精確稱定重量（稱量瓶中樣品厚度應(yīng)在5mm以下)，放入五氧化二磷干燥器中，打開瓶蓋，于60℃將干燥器抽真空至133Pa以下，干燥至恒重。干燥完畢應(yīng)緩慢通入經(jīng)濃硫酸脫水的干燥空氣。
5．3 計算
樣品水分含量%（g/g)=干燥失重/樣品重量×100
