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重組體BMP-2的生產(chǎn)

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1484651A  
公開(kāi)(公告)日 2004.03.24  
申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) CN01821777.X  
申請(qǐng)日期 2001.11.27  
專(zhuān)利名稱(chēng) 重組體BMP-2的生產(chǎn)  
主分類(lèi)號(hào) C07K14/51  
分類(lèi)號(hào) C07K14/51;C12N15/67;A61K38/18  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2000.11.29 DE 10059336.4  
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 斯?fàn)柕鞍踪|(zhì)有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 R·魯?shù)婪?E·施沃茨;G·赫爾  
地址 德國(guó)哈雷  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng) PCT/EP01/13840 2001.11.27  
進(jìn)入國(guó)家日期 2003.07.04  
專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) 中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 吳亦華  
國(guó)省代碼 德國(guó);DE  
主權(quán)項(xiàng) 重組地制備TGF-β超家族的生物活性蛋白質(zhì)的方法,其特征在于,(a)一種蛋白質(zhì),其末端由一種TGF-β超家族蛋白質(zhì)的前序列或部分所述前序列組成,該氨末端與此種或另一種TGF-β超家族蛋白質(zhì)的成熟區(qū)域連接,該蛋白質(zhì)與成熟BMP-2至少有35%同源性,在至少部分蛋白質(zhì)能以包含體的形式而獲得的條件下將所述蛋白質(zhì)于原核生物中進(jìn)行表達(dá);(b)分離包含體并在變性條件下溶解;(c)將從包含體中溶解的、變性的、單體的和無(wú)生物活性的蛋白質(zhì)復(fù)性,使之通過(guò)折疊和二聚體化能夠形成可溶的、有生物活性的構(gòu);和(d)如果必要,在復(fù)性之后經(jīng)蛋白質(zhì)水解將成熟蛋白質(zhì)從其前體形式中釋放出來(lái)。  
摘要 為了重組生產(chǎn)一種TGF-β超家族的生物活性蛋白質(zhì),將蛋白質(zhì)在原核生物中表達(dá)。該被表達(dá)蛋白質(zhì)的氨末端由一種TGF-β超家族蛋白質(zhì)的前序列或其部分組成,將該蛋白質(zhì)或另一種TGF-β超家族蛋白質(zhì)的成熟區(qū)域連接到該蛋白質(zhì)上,所連接上的蛋白質(zhì)具有和成熟BMP-2至少35%的同源性。蛋白質(zhì)的表達(dá)在至少有一部分蛋白質(zhì)以包含體的形式而獲得。分離出包含體,并在變性條件下溶解。從包含體中溶解的、變性的、單體的和無(wú)生物活性的蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)折疊和二聚體化變性形成可溶的、有生物活性的構(gòu)象,必要時(shí),在復(fù)性之后將成熟蛋白質(zhì)從其前體形式中經(jīng)蛋白水解而釋放出來(lái)。  
國(guó)際公布 WO02/44203 德 2002.6.6  
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