公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1484651A
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公開(kāi)(公告)日
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2004.03.24
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申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào)
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CN01821777.X
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申請(qǐng)日期
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2001.11.27
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專(zhuān)利名稱(chēng)
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重組體BMP-2的生產(chǎn)
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主分類(lèi)號(hào)
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C07K14/51
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分類(lèi)號(hào)
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C07K14/51;C12N15/67;A61K38/18
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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2000.11.29 DE 10059336.4
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申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人
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斯?fàn)柕鞍踪|(zhì)有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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R·魯?shù)婪?E·施沃茨;G·赫爾
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地址
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德國(guó)哈雷
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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PCT/EP01/13840 2001.11.27
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進(jìn)入國(guó)家日期
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2003.07.04
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專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu)
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中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所
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代理人
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吳亦華
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國(guó)省代碼
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德國(guó);DE
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主權(quán)項(xiàng)
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重組地制備TGF-β超家族的生物活性蛋白質(zhì)的方法,其特征在于,(a)一種蛋白質(zhì),其氨末端由一種TGF-β超家族蛋白質(zhì)的前序列或部分所述前序列組成,該氨末端與此種或另一種TGF-β超家族蛋白質(zhì)的成熟區(qū)域連接,該蛋白質(zhì)與成熟BMP-2至少有35%同源性,在至少部分蛋白質(zhì)能以包含體的形式而獲得的條件下將所述蛋白質(zhì)于原核生物中進(jìn)行表達(dá);(b)分離包含體并在變性條件下溶解;(c)將從包含體中溶解的、變性的、單體的和無(wú)生物活性的蛋白質(zhì)復(fù)性,使之通過(guò)折疊和二聚體化能夠形成可溶的、有生物活性的構(gòu)象;和(d)如果必要,在復(fù)性之后經(jīng)蛋白質(zhì)水解將成熟蛋白質(zhì)從其前體形式中釋放出來(lái)。
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摘要
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為了重組生產(chǎn)一種TGF-β超家族的生物活性蛋白質(zhì),將蛋白質(zhì)在原核生物中表達(dá)。該被表達(dá)蛋白質(zhì)的氨末端由一種TGF-β超家族蛋白質(zhì)的前序列或其部分組成,將該蛋白質(zhì)或另一種TGF-β超家族蛋白質(zhì)的成熟區(qū)域連接到該蛋白質(zhì)上,所連接上的蛋白質(zhì)具有和成熟BMP-2至少35%的同源性。蛋白質(zhì)的表達(dá)在至少有一部分蛋白質(zhì)以包含體的形式而獲得。分離出包含體,并在變性條件下溶解。從包含體中溶解的、變性的、單體的和無(wú)生物活性的蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)折疊和二聚體化變性形成可溶的、有生物活性的構(gòu)象,必要時(shí),在復(fù)性之后將成熟蛋白質(zhì)從其前體形式中經(jīng)蛋白水解而釋放出來(lái)。
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國(guó)際公布
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WO02/44203 德 2002.6.6
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