公開(公告)號(hào)
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CN1490334A
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公開(公告)日
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2004.04.21
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN02137509.7
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申請(qǐng)日期
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2002.10.18
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專利名稱
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基因特異性抗體的親和純化方法
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主分類號(hào)
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C07K16/18
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分類號(hào)
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C07K16/18;C07K1/16;C12N15/79
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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繆金明
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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繆金明
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地址
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201204上海市浦東新區(qū)白楊路360弄5號(hào)1101室
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頒證日
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國際申請(qǐng)
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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一種親和純化基因免疫所產(chǎn)生的特異性抗體的方法,該方法包括:a)將帶有特定基因和6×His的真核細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒免疫動(dòng)物,產(chǎn)生含有基因特異性抗體的血清或卵黃免疫球蛋白粗提物;b)將該質(zhì)粒在體外轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞或制備原核表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化原核細(xì)胞,培養(yǎng)后將細(xì)胞裂解液加到金屬離子螯合樹脂柱,由于重組蛋白帶有6×His片段,可以與樹脂中的金屬離子螯合,被吸附于樹脂表面,制成親和層析柱;c)在進(jìn)行特異抗體親和層析時(shí),將含有基因特異性抗體的血清或卵黃免疫球蛋白粗提物加到親和層析柱,特異性抗體與相應(yīng)的抗原重組蛋白充分結(jié)合后,先洗掉非特異性的抗體和雜蛋白,最后洗柱收集基因特異性的抗體。
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摘要
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本發(fā)明是一種涉及親和純化基因免疫所產(chǎn)生的特異性抗體的方法,該方法將帶有特定基因和6×His的真核細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒免疫動(dòng)物,制備含有基因特異性抗體(IgG)的血清或卵黃免疫球蛋白(IgY)粗提物;將該質(zhì)粒在體外轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞,培養(yǎng)后將細(xì)胞裂解液加到金屬離子螯合樹脂柱,由于重組蛋白帶有6×His片段,可以與樹脂中的金屬離子螯合,被吸附于樹脂表面,制成親和層析柱;在進(jìn)行特異抗體親和層析時(shí),將含有基因特異性抗體(IgG)的血清或卵黃免疫球蛋白(IgY)粗提物加到親和層析柱,基因特異性抗體與相應(yīng)的抗原重組蛋白充分結(jié)合后,先洗掉非特異性的抗體和雜蛋白,最后洗柱收集基因特異性的抗體。該方法純化的抗體將消除目前多克隆抗體(IgG或IgY)純度低所產(chǎn)生的交叉結(jié)合現(xiàn)象。
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國際公布
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