公開(公告)號
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CN1146657C
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公開(公告)日
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2004.04.21
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申請(專利)號
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CN01100579.3
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申請日期
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2001.01.16
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專利名稱
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一種重組單純皰疹病毒的構(gòu)建及用途
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主分類號
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C12N7/01
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分類號
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C12N7/01;C12N15/33;C12N15/52;C12N9/00;C12N15/63;A61K48/00;//(C12N7/01,C12R1:92)
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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本元正陽基因技術(shù)股份有限公司
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發(fā)明(設(shè)計)人
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吳小兵;曹暉;侯云德
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地址
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100176 北京市經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)永昌中路6號
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頒證日
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2004.04.21
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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代理人
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國省代碼
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北京;11
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主權(quán)項
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一種重組HSV病毒,其特征在于,所述的重組HSV病毒的HSV-1基因組中去除了包裝信號pac,并插入了一個包含兩個同向排列的loxP的包裝信號loxP-pac-loxP;所述的重組HSV病毒的HSV-1基因組中插入了一個帶有可誘導(dǎo)啟動子的重組酶Cre基因。
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摘要
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本發(fā)明提出了一種重組單純皰疹病毒,其天然的包裝信號(pac)已經(jīng)缺失,取而代之的是一個經(jīng)過改造的包裝信號,該包裝信號兩端各帶一個重組序列:loxP序列;在本重組病毒基因組中的另一處插入了一個編碼特異識別上述重組序列的重組酶Cre的基因,該Cre的基因帶有一個可調(diào)控的啟動子:金屬硫蛋白啟動子,以控制Cre的表達。該重組病毒感染細胞后,加入適量鋅離子激活金屬硫蛋白啟動子,表達重組酶Cre,Cre介導(dǎo)兩個loxP序列間發(fā)生重組,將包裝信號切除,從而病毒基因組雖然能復(fù)制和表達各種蛋白,但基因組無法包裝進病毒衣殼中,因此不產(chǎn)生子代病毒。如果細胞中不加鋅離子,Cre不表達,重組病毒基因組上的包裝信號不被切除,因此該重組病毒能在細胞中可以正常復(fù)制和傳代。本發(fā)明提出的重組病毒可以用作單純皰疹病毒擴增子載體的輔助病毒,以及直接作為基因治療載體用于惡性腫瘤的治療,和用于病毒空殼的制備。
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國際公布
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