公開(公告)號
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CN1491964A
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公開(公告)日
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2004.04.28
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申請(專利)號
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CN02145913.4
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申請日期
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2002.10.23
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專利名稱
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一種純化血紅蛋白的方法
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主分類號
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C07K14/805
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分類號
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C07K14/805;C07K1/14
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國科學(xué)院過程工程研究所
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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蘇志國;路秀玲;金業(yè)濤;趙東旭
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地址
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100080北京市海淀區(qū)中關(guān)村北二條1號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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北京律誠同業(yè)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
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代理人
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王鳳華
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國省代碼
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北京;11
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主權(quán)項(xiàng)
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一種純化血紅蛋白的方法,包括如下步驟:(1)床層平衡:用pH值為5.0~8.0的平衡液緩沖液以2~5cm/min-1的線流速自下而上平衡擴(kuò)張床吸附介質(zhì),直至擴(kuò)張床層穩(wěn)定后;其中擴(kuò)張床吸附介質(zhì)為粒徑分布在50~300μm之間的陽離子交換介質(zhì)或金屬親和層析介質(zhì);(2)進(jìn)料吸附:將紅細(xì)胞裂解液pH值調(diào)成5.0~8.0,以2~5cm/min-1的線流速自下而上進(jìn)料,進(jìn)料過程中注意保持適當(dāng)高度和空隙率;(3)淋洗:進(jìn)料完畢后,保持床層擴(kuò)張狀態(tài),用pH值為5.0~8.0的平衡液緩沖液以2~5cm/min-1的線流速自下而上洗去滯留在床層中未結(jié)合的蛋白、細(xì)胞碎片等雜質(zhì)和其它與介質(zhì)結(jié)合不牢的物質(zhì);(4)改變pH值洗脫:將床層改為固定床操作,在2~20℃溫度情況下,用pH值為6.0-8.0的平衡緩沖液以2~5cm/min-1的線流速自上而下流過床層,收集樣品,整個純化過程控制在2-20℃。
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摘要
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本發(fā)明提供了一種純化血紅蛋白的方法。本方法采用擴(kuò)張床吸附技術(shù),以自下而上的進(jìn)料方式使層析介質(zhì)膨脹擴(kuò)張,細(xì)胞碎片、雜蛋白等雜質(zhì)直接通過床層,血紅蛋白被介質(zhì)吸附,實(shí)現(xiàn)從人或牛、豬、羊等動物的血紅細(xì)胞裂解液中直接純化血紅蛋白。該技術(shù)省去離心或過濾去除碎片步驟,僅一步操作產(chǎn)品即達(dá)電泳純,操作時間短,提取收率高,產(chǎn)品活性損失小,是一種簡捷、高效、適合工業(yè)化生產(chǎn)的天然血紅蛋白制備方法。
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國際公布
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