公開(公告)號
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CN1563364A
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公開(公告)日
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2005.01.12
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申請(專利)號
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CN200410017588.8
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申請日期
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2004.04.09
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專利名稱
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三維立體培養(yǎng)和誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨細(xì)胞的方法
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主分類號
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C12N5/08
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分類號
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C12N5/08;C12N11/02
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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華東理工大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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周燕;譚文松;蔣丹丹;胡靜波
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地址
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200237上海市梅隴路130號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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中原信達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司
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代理人
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羅大忱
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項
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一種三維立體培養(yǎng)和誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨細(xì)胞的方法,其特征在于,包括如下步驟:(1)將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在預(yù)置有培養(yǎng)基和微載體的懸浮培養(yǎng)裝置中懸浮培養(yǎng),在攪拌下擴(kuò)增骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;所說的培養(yǎng)基為含有2%~20%體積百分比胎牛血清的α-MEM;所說的微載體為Cytodex3微載體;(2)然后將成軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)基加入含收獲的Cytodex3微載體以及在其上生長的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)裝置中,對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行聚團(tuán)成軟骨細(xì)胞誘導(dǎo);成軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)基以DMEM為基礎(chǔ),添加濃度為1~10μg/ml的胰島素、1~20ng/ml的轉(zhuǎn)化生長因子β3、10~150nmol/L的地塞米松、10~100mg/ml的抗壞血酸磷酸酯、10~100mg/ml的脯氨酸、0.5~5mmol/L的丙酮酸鈉。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種三維立體培養(yǎng)和誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨細(xì)胞的方法,包括如下步驟:1.將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在預(yù)置有培養(yǎng)基和微載體的懸浮培養(yǎng)裝置中懸浮培養(yǎng),在攪拌下擴(kuò)增骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;2.然后將成軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)基加入含收獲的Cytodex 3.微載體以及在其上生長的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)裝置中,對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行聚團(tuán)成軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)。本發(fā)明的方法可在短時間內(nèi)一次獲得大量的軟骨細(xì)胞,降低了污染幾率,減少了細(xì)胞損傷,有利于細(xì)胞間營養(yǎng)物質(zhì)的傳遞。誘導(dǎo)完成后可直接將該復(fù)合物移植入體內(nèi)進(jìn)行軟骨缺損修復(fù)實驗或為科學(xué)研究提供充足的種子細(xì)胞來源。
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國際公布
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