公開(公告)號 | CN1687405A |
公開(公告)日 | 2005.10.26 |
申請(專利)號 | CN200510064798.7 |
申請日期 | 2005.04.22 |
專利名稱 | 人卵巢癌耐藥細胞株及其培養(yǎng)方法 |
主分類號 | C12N5/10 |
分類號 | C12N5/10 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 李紅霞 |
發(fā)明(設(shè)計)人 | 李紅霞;周友珍;張素梅;魏麗惠 |
地址 | 100038北京市海淀區(qū)北京世紀壇醫(yī)院婦產(chǎn)科 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構(gòu) | 北京市商泰律師事務(wù)所 |
代理人 | 谷勝斌 |
國省代碼 | 北京;11 |
主權(quán)項 | 一種人卵巢癌耐藥細胞株培養(yǎng)方法,其特征在于:(1)藥物:拓撲替康(TOP)或紫杉醇(TAX);(2)用藥劑量:采用TAX的終濃度為300ug/ml或TOP的終濃度為2160ng/ml作為大劑量沖擊用量;(3)親代細胞培養(yǎng):人卵巢上皮癌細胞株SKOV3細胞生長于含15%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中,置入5%CO2、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng);(4)卵巢癌耐藥細胞株誘導(dǎo):取對數(shù)生長期細胞,0.25%的胰酶消化后計數(shù),以5×105/ml細胞接種于培養(yǎng)瓶(以每瓶5ml接種),24小時后細胞貼壁,再加入終濃度為300ug/ml的TAX或終濃度為2160ng/ml的TOP作用2小時,棄去培養(yǎng)液,用磷酸鹽緩沖液(PBS)洗3遍,更換新鮮培養(yǎng)液,待細胞恢復(fù)生長再進行第二次沖擊,如此反復(fù)作用,TAX共加藥沖擊12次或TOP共加藥沖擊13次,歷時10個月建成人卵巢癌耐藥細胞株SKOV3/TAX、或SKOV3/TOP。 |
摘要 | 本發(fā)明涉及一種人卵巢癌紫杉醇耐藥細胞株SKOV3/TAX或拓撲替康耐藥細胞株SKOV3/TOP及其培養(yǎng)方法,其特征是選擇人卵巢癌細胞株SKOV3作為親代細胞,選用TAX的終濃度為300ug/ml或TOP的終濃度為2160ng/ml作為大劑量沖擊用量,以反復(fù)大劑量沖擊方式間歇用藥,建立SKOV3/TAX細胞耐藥指數(shù)(RI)為10.57,除對TAX耐藥外,對5-氟尿嘧啶有明顯的交叉耐藥,SKOV3/TO P細胞耐藥指數(shù)(RI)為10.67,除對TOP耐藥外,對米托蒽醌(MX)、喜樹堿(CPT)、長春新堿(VCR)有明顯的交叉耐藥,與敏感細胞相比P<0.01。 |
國際公布 |