| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1800202A |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2006.07.12 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200610037909.X |
| 申請(qǐng)日期 | 2006.01.20 |
| 專利名稱 | 從心肌中提取純化高鐵肌紅蛋白的方法 |
| 主分類號(hào) | C07K1/14(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C07K1/14(2006.01)I;C07K14/805(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 南京師范大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 金邦荃;湯祥明;劉興余 |
| 地址 | 210097江蘇省南京市寧海路122號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 南京知識(shí)律師事務(wù)所 |
| 代理人 | 盧亞麗 |
| 國(guó)省代碼 | 江蘇;32 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種從心肌中提取純化高鐵肌紅蛋白的方法，包括以下步驟： 1)將新鮮動(dòng)物心肌剁碎，加入冰冷的肌紅蛋白萃取緩沖液，經(jīng)勻漿、離心、過(guò)濾后得粗提液；所說(shuō)的肌紅蛋白萃取緩沖液是10mMTris-HCl，1mMEDTA，pH8.0； 2)粗提液經(jīng)70％-100％硫酸銨鹽析，得到的沉淀用平衡緩沖液A重懸，再加入過(guò)量的K3Fe(CN)6，離心后取上清液對(duì)平衡緩沖液A透析，透析膜的截留分子量為14000，得透析液；所說(shuō)的平衡緩沖液A是10mMTris-HCl，1mMEDTA，10mMNaCl，pH8.5； 3)將透析液上樣到DEAE-SepharoseFastFlow陰離子交換層析柱，用平衡緩沖液A洗脫，收集洗脫峰對(duì)應(yīng)的紅褐色洗液； 4)將收集的洗脫液泠凍干燥濃縮后，上樣到SephacrylS-200HR凝膠過(guò)濾層析柱，用平衡緩沖液B洗脫，收集洗脫峰相對(duì)應(yīng)的紅褐色洗脫液，即得到純化的高鐵肌紅蛋白；所說(shuō)的平衡緩沖液B是100mMTris-HCl，100mMNaCl，pH7.5。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種蛋白的提取純化工藝，具體是從心肌中提取純化高鐵肌紅蛋白的方法。具體的方法是：將新鮮動(dòng)物心肌經(jīng)前處理，萃取得到組織蛋白粗提物；粗提物再經(jīng)硫酸銨鹽析后，通過(guò)截留分子量為14000的透析處理得透析樣品；將透析樣品經(jīng)DEAE-Sepharose Fast Flow陰離子交換層析，收集紅褐色洗脫液；收集的洗脫液再經(jīng)Sephacryl S-200HR凝膠過(guò)濾層析，收集洗脫峰相對(duì)應(yīng)的紅褐色洗脫液，即得到純化的高鐵肌紅蛋白。本發(fā)明方法具有產(chǎn)品純度高，工藝簡(jiǎn)單、成本低等優(yōu)點(diǎn)，既可填補(bǔ)我國(guó)該生物試劑制備的空白，又具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。 |
| 國(guó)際公布 |
