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人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的分離及培養(yǎng)方法及醫(yī)用組合物

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1810959A  
公開(kāi)(公告)日 2006.08.02  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200610033007.9  
申請(qǐng)日期 2006.01.13  
專利名稱 人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的分離及培養(yǎng)方法及醫(yī)用組合物  
主分類號(hào) C12N5/08(2006.01)I  
分類號(hào) C12N5/08(2006.01)I;A61K35/50(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 深圳市北科生物科技有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 胡 祥;楊 波  
地址 518057廣東省深圳市南山區(qū)科技園深港產(chǎn)學(xué)研基地大樓西座W400座  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 深圳市中知專利商標(biāo)代理有限公司  
代理人 宋湘紅  
國(guó)省代碼 廣東;44  
主權(quán)項(xiàng) 一種人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的分離及培養(yǎng)方法,其特征在于包括如下順序的步驟: (1)取人羊膜先用胰蛋白酶消化,然后用膠原酶、脫核糖核酸酶消化,得到細(xì)胞懸液; (2)將上一步所得的細(xì)胞懸液過(guò)濾,制成單細(xì)胞懸液; (3)將第(2)步所得細(xì)胞接種于培養(yǎng)基中,置于37℃、飽和濕度、體積分?jǐn)?shù)為5%的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),并通過(guò)換液和傳代,使人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞逐漸得到擴(kuò)增和純化,所述培養(yǎng)基采用VDMEM∶VF12=1∶1的DMEM/F12培養(yǎng)基,其中含有體積百分含量為10%-20%的胎牛血清和終濃度為10-20ng/ml的堿性成纖維生長(zhǎng)因子。  
摘要 本發(fā)明為一種人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的分離及培養(yǎng)方法及醫(yī)用組合物,分離及培養(yǎng)方法是將人羊膜用胰蛋白酶、膠原酶、脫氧核糖核酸酶相繼消化,然后過(guò)濾制成單細(xì)胞懸液,再采用加有體積百分含量為10%-20%的胎牛血清和終濃度為10-20ng/ml的堿性成纖維生長(zhǎng)因子的VDMEM∶VF12=1∶1的DMEM/F12培養(yǎng)基,置于37℃、飽和濕度、體積分?jǐn)?shù)為5%的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),通過(guò)換液和傳代,使人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞逐漸得到擴(kuò)增和純化。本發(fā)明方法具有來(lái)源廣泛,不受倫理限制等優(yōu)越性,具有廣闊的應(yīng)用前景,本發(fā)明的醫(yī)用組合物可用于神經(jīng)替代治療、用于心肌梗塞的治療、用于糖尿病的治療、用于骨組織工程、應(yīng)用于整形外科等。  
國(guó)際公布  
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