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白芍提取物--白芍總苷含量測定方法--HPLC法

  
方法名稱:
  白芍提取物--白芍總苷含量測定--HPLC法
應(yīng)用范圍:
  測定白芍提取物中白芍總苷的含量
方法原理:
 白芍藥材水提取得白芍總苷,白芍總苷經(jīng)5%NaOH經(jīng)超聲處理,沸水浴水解,經(jīng)液相色譜儀分離,在230nm處測定峰面積,以苯甲酸為對照品,計算其中白芍總苷的含量。
儀器設(shè)備及實驗條件:
 

儀器設(shè)備  Waters 1525泵,2487雙通道紫外檢測器,Waters柱溫箱,Breeze 液相色譜工作站(美國Water 公司);

色譜條件  Supelco Discovery C18色譜柱(4.mm×150.mm,5μm);流動相:甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀-異丙醇-冰醋酸(67∶173∶4∶4);檢測波長:230nm;流速:1mL/min;柱溫:35℃。

試樣制備:
 

對照品溶液的制備  精稱5.2mg苯甲酸對照品,置25mL量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻;精密吸取該溶液1mL,置25mL量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,制得濃度為8.32μg·mL- 1的苯甲酸對照品溶液。

供試品溶液的制備  稱取市售白芍飲片1.0kg,加水10倍,煎煮2.0h,第2次加水8倍,煎煮1.5h,合并煎液,濾過,濾液過已處理好的大孔吸附樹脂,先用水洗滌,再用70%乙醇洗脫,回收乙醇,干燥,得紫棕色粉末,即為白芍總苷。精密稱取白芍總苷粗品約30mg至25mL量瓶,加5%NaOH溶液至刻度,超聲,溶解,搖勻。精密吸取該溶液0.5mL,置5mL具塞試管中,沸水浴水解2h后,冷卻至室溫,轉(zhuǎn)移至10mL量瓶,用流動相與甲醇反復(fù)蕩洗試管壁,定容至刻度,搖勻,即得。

操作步驟:
  精密吸取該溶液5μL,注入色譜儀,由峰面積計算出苯甲酸的含量,再由公式:白芍總苷含量% = 苯甲酸含量%×480.27 122.12,計算白芍總苷的含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:m.f1411.cn)
備注:
 
參考文獻:
  劉玉紅,陳燕,易進海.HPLC測定白芍總苷的含量.華西藥學(xué)雜志.2002,17(4):295~296
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