美國(guó)貝克曼庫爾特儀器公司生產(chǎn)的五分類血球計(jì)數(shù)儀,除了ACT 5 Diff型號(hào)采用染色法以外,其余的,如MaxM,HmX,STKS,Gen’s,HL700系列等均采用流式結(jié)構(gòu)的VCS分類技術(shù)。
VCS中S代表激光散射性,反映細(xì)胞在聚焦點(diǎn)時(shí)的形狀和表面特性,與醫(yī)學(xué)全.在線m.f1411.cn細(xì)胞的皺折和表面積大小有關(guān); C是射頻傳導(dǎo)特性,由流式池內(nèi)的雙電極加高頻電流測(cè)得,主要反映細(xì)胞的核質(zhì)比大小;V是雙電極的直流特性,即利用庫爾特原理測(cè)量出原態(tài)白細(xì)胞的體積大小。
下圖中從sample in流進(jìn)的血液,只有原態(tài)大小的白細(xì)胞。這是因?yàn)?由分血片采集到的用于五分類的28微升血樣,先與Erythrolyse溶血素試劑混合,其中的紅細(xì)胞和血小板被pak lyse脹破溶解掉,同時(shí)所有的白細(xì)胞也已經(jīng)漲大,但它們馬上又與Stabilyse(pak preserve)溶血素混合,將漲大的白細(xì)胞收縮回原態(tài)大小。
每次原態(tài)白細(xì)胞的VCS測(cè)量,在MaxM的流式通道中進(jìn)行,共計(jì)數(shù)8192個(gè)顆粒。這里面可能會(huì)含有未溶解的紅細(xì)胞,大血小板和一些試劑雜質(zhì)。所以實(shí)際測(cè)量到的白細(xì)胞數(shù)量,最多只能為8192個(gè),并且白細(xì)胞數(shù)量占8192的比重,越大越好。這8192個(gè)顆粒通過流式通道的時(shí)間,MaxM認(rèn)為應(yīng)該與白細(xì)胞的總數(shù)有關(guān)。最優(yōu)化的時(shí)間為白細(xì)胞總數(shù)去除63。假設(shè)此樣本的WBC值為6.3,那么它在流式池中通過的最優(yōu)化時(shí)間應(yīng)該為10秒鐘,優(yōu)化時(shí)間范圍在9-11秒。(10±1秒)。
*如果在超出優(yōu)化時(shí)間50%以上,仍未數(shù)到8192個(gè)顆粒,就會(huì)報(bào)PC1錯(cuò)誤。出現(xiàn)這種情況一般為流式通道堵塞所致,通常用次氯酸做個(gè)消毒程序(Disinfection),可以解決。
*如果在小于1秒鐘時(shí)間內(nèi),馬上數(shù)到了8192個(gè)顆粒,MaxM會(huì)認(rèn)為白細(xì)胞通過流式通道的速度太快,機(jī)器會(huì)報(bào)PC2錯(cuò)誤。
這種情況下,產(chǎn)生的原因一般是8192個(gè)微粒中,有許多未被E-lyse溶解掉的紅細(xì)胞和血小板(并且占大多數(shù)),即pak lyse基本不起作用。孕婦,腎病人血樣等會(huì)經(jīng)常出現(xiàn)這種PC2情況,原因是這些樣本的紅細(xì)胞壁太厚,在pak lyse作用下很難漲破。適當(dāng)增大pak lysel泵入量,可以大大減少PC2報(bào)警率。但有一少部分血樣需要被稀釋后,再測(cè)量出五分類的百分比數(shù)值。
但是,如果鞘液流動(dòng)出現(xiàn)問題,也會(huì)同樣造成PC1和PC2錯(cuò)誤。
這一般是由上,下鞘流的液阻堵塞造成。如果上部的液阻(6英寸負(fù)壓調(diào)節(jié)器旁的螺旋細(xì)鐵管)堵塞,會(huì)有PC1故障。下面的液阻(mixing chamber旁的細(xì)軟管)堵塞,會(huì)有PC2故障。
還有一種情況,在沒有任何報(bào)警下,機(jī)器不報(bào)告五分類結(jié)果。顯示…..,遇到這種情況,先做一個(gè)乳膠質(zhì)控(Latron Control 2),看一看V,C,S的增益值和CV值是否在控。它們的增益可以分別用電位器R17,R26和R8來調(diào)節(jié),c的cv值可以通過更換RF射頻電子管來滿足要求,s的cv值由TTM的激光束聚焦位置決定(一般在出廠后,無需再調(diào)整)。