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養(yǎng)豬疾病免費問答:如何診斷豬偽狂犬病?

如何診斷豬偽狂犬病?

感謝大夫為我快速解答——該如何治療和防治


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1.病毒分離 鑒定病毒的分離是診斷偽狂犬病的可靠方法;疾游锏亩喾N病料組織如腦、心、肝、脾、肺、腎、扁體等均可用于病毒的分離,但以腦組織和扁桃體最為理想,另外,鼻咽分泌物也可用于病毒的分離。病料處理后可直接接種敏感細胞,如豬腎傳代細胞(PK-15和IBRS-2)、倉鼠腎傳代細胞(BHK-21)或雞胚成纖維細胞(CEF),在接種后24?72h內可出現典型的細胞病變。若初次接種無細胞病變,可傳3代。不具備細胞培養(yǎng)條件時,可將處理的病料接種家或小鼠,根據家兔或小鼠的臨診表現做出判定,但小鼠不如家兔敏感。分離到病毒后再用標準陽性血清做中和試驗以確診本病。2.組織切片 焚光抗體檢測取患病動物的病料如腦或扁桃體的壓片或冰凍切片,用直接免疫熒光檢查。其優(yōu)點是快速,在幾小時內即可獲得可靠結果,對于新生仔豬,其敏感性與病毒分離相當,但對于育肥豬與成年豬,該法則不如病毒分離敏感。3.PCR檢測 PRV利用PCR可從患病動物的分泌物如鼻咽拭子或組織病料中擴增PRV的基因,從而對患病動物進行確診。PCR與病毒分離鑒定相比,具有快速、敏感、特異性強等優(yōu)點,能同時檢測大批量的樣品,并且能進行活體檢測,適合于臨診診斷。4.血清學診斷 多種血清學方法可用于偽狂犬病的診斷,應用最廣泛的有中和試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗、乳膠凝集試驗、補體結合試驗及間接免疫熒光等。其中血清中和試驗的特異性、敏感性都是最好的,并且被世界動物衛(wèi)生組織(OIE)列為法定的診斷方法。但由于中和試驗的技術條件要求高、時間長,所以主要是用于實驗室研究。酶聯(lián)免疫吸附試驗同樣具有特異性強、敏感性髙的特點,3?4h內可得出試驗結果,并可同時檢測大批量樣品,廣泛用于偽狂犬病的臨診診斷。另外,近幾年來,乳膠凝集試驗以其獨特的優(yōu)點也在臨診上廣泛應用,乳膠凝集試驗可謂“傻瓜”技術,操作極其簡便,幾分鐘之內便可得出試驗結果。5.鑒別診斷 PRV鑒別診斷方法是在使用基因標志疫苗的基礎上應用的一類診斷方法。由于PRV中存在多個非心需糖蛋白基因,缺失這些基因的病毒突變株不能產生被缺失基因所編碼的糖蛋白,但又不影響病毒在細胞上的增殖與免疫原性。將這種基因缺失標志疫苗注射動物后,動物不能產生針對缺失蛋白的抗體。因此,可通過血清學方法將自然感染野毒的血清學陽性豬與注苗豬區(qū)分開來。目前,缺失疫苗缺失的糖蛋白基因主要為gE和gG基因,也有缺失gC、gB基因的。針對缺失的糖蛋白已利用大腸桿菌或酵母等表達系統(tǒng)的表達產物建立了相應的鑒別診斷方法:gE-ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)、gG-ELISA、gC-ELISA、gB-ELISA以及gE-LAT(乳膠凝集試驗)、gG-LAT等,實驗證實這些方法的特異性強、敏感性高,可用于臨診檢測,同時乳膠凝集還具有簡單、快速的特點。
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