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感謝大夫?yàn)槲铱焖俳獯稹撊绾沃委熀头乐?/p>
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一)細(xì)菌學(xué)檢查 1．病料采取生前可于局部穿刺采取水腫液。死后除采取局部水腫液及壞死組織外，還要采取肝、脾、腎、肺及心血，尤以肺臟含菌較多。 2．涂片、鏡檢將水腫液、心血、臟器等制作涂片，肝臟表面作觸片，自然干燥、火焰固定后，用革蘭染色法染色鏡檢。 本菌是在肝表面及漿膜觸片染色標(biāo)本中，菌體形成微彎曲的長(zhǎng)絲狀，這一形態(tài)特征在診斷上具有很重要的含義。芽孢較菌體大，呈卵圓形，位于菌體中央或近端。能運(yùn)動(dòng)，無(wú)莢膜，革蘭染色陽(yáng)性。 3．細(xì)菌分離培養(yǎng) 采取局部水腫液或尸體的肝臟組織，放于肝片肉湯中，置37℃恒溫箱中培養(yǎng)，24h肝片肉湯呈現(xiàn)混濁，有沉淀。經(jīng)3-4d后，取沉淀物0.1 - 0.5mL，接于肝片肉湯中，于80℃溫水中30min后取出，冷卻后置于37℃溫箱中培養(yǎng)，待充分發(fā)育后利用普通瓊脂斜面培養(yǎng)，經(jīng)證明無(wú)需氧菌混雜時(shí)，利用血液葡萄糖瓊脂平板進(jìn)行厭氧分離培養(yǎng)，當(dāng)見(jiàn)有呈卷曲長(zhǎng)絲狀、柔嫩花邊樣菌落，并有溶血環(huán)時(shí)，可以初步認(rèn)為是腐敗梭菌。 4．動(dòng)物感染試驗(yàn) 取局部水腫液或尸體肝臟組織制成5-10倍懸液，或用肝片肉湯培養(yǎng)物0.1-0.2mL，接種于豚鼠股部肌肉，18-24h豚鼠死亡，注射部位發(fā)生嚴(yán)重出血性水腫，肌肉濕潤(rùn)，呈鮮紅色，局部水腫液涂片鏡檢，發(fā)現(xiàn)有兩端鈍圓的大桿菌。肝表面觸片鏡檢，見(jiàn)有長(zhǎng)絲狀大桿菌時(shí)，即可確診。 5．熒光抗體染色法（直接法) 取肝臟表面觸片數(shù)張，先用丙酮固定10min，再經(jīng)磷酸鹽緩沖液浸洗2 - 3min后，放人事先墊有浸濕濾紙，并在恒溫箱內(nèi)預(yù)熱至3 7℃的大培養(yǎng)皿中，再滴加腐敗梭菌的熒光抗體數(shù)滴于標(biāo)本片上，蓋上皿蓋，作用30min，取出，將標(biāo)本片先后在兩個(gè)盛有磷酸鹽緩沖液的小缸內(nèi)各浸洗5 - 7min，干后滴緩沖甘油（無(wú)水甘油9份，緩沖液1份)1滴，蓋上蓋玻片，于熒光顯微鏡下檢查，如見(jiàn)有鮮艷的黃綠色無(wú)關(guān)節(jié)長(zhǎng)絲狀菌體，即可確診。 取病料，然后接種于肉肝湯，在3 7 ℃厭氧培養(yǎng)24- 48h，純化后進(jìn)行牛乳發(fā)酵試驗(yàn)來(lái)鑒定產(chǎn)氣莢膜梭菌，牛乳培養(yǎng)基的“暴烈發(fā)酵”是產(chǎn)氣莢膜梭菌最突出的生化特性，肉肝湯中5 - 6h即呈均勻渾濁，并產(chǎn)生大量氣體，接種培養(yǎng)于牛乳培養(yǎng)基中8- 10h后，牛乳即被酸凝固，同時(shí)產(chǎn)生大量氣體，使凝塊變成多孔的海綿狀，嚴(yán)重時(shí)被沖成數(shù)段，甚至噴出管外。腐敗梭菌在牛乳中產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，緩慢凝固牛乳。
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謝謝分享。。
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學(xué)習(xí)，，
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