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一種用于評價HCVNS3/4A絲氨酸蛋白酶抑制劑的融合蛋白及其應(yīng)用

公開(公告)號 CN101153060A  
公開(公告)日 2008.04.02  
申請(專利)號 CN200710175298.X  
申請日期 2007.09.28  
專利名稱 一種用于評價HCV NS3/4A絲氨酸蛋白酶抑制劑的融合蛋白及其應(yīng)用  
主分類號 C07K19/00(2006.01)I  
分類號 C07K19/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12N15/79(2006.01)I;C12Q1/37(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院野戰(zhàn)輸血研究所  
發(fā)明(設(shè)計)人 詹林盛;賈帥爭;付秋霞  
地址 100850北京市海淀區(qū)太平路27號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 魯 兵  
國省代碼 北京;11  
主權(quán)項 用于評價HCV NS3/4A絲氨酸蛋白酶活性的融合蛋白,由細(xì)胞內(nèi)定位因子-NS3/4A絲氨酸蛋白酶作用底物-報告基因SEAP組成的融合基因插入真核表達(dá)載體形成指示載體后表達(dá)產(chǎn)生。  
摘要 本發(fā)明公開了用于評價HCV NS3/4A絲氨酸蛋白酶活性的融合蛋白及其應(yīng)用,具體的融合蛋白EGFP-NS4A/4B-SEAP是融合基因EGFP-NS4A/4B-SEAP插入真核表達(dá)載體PCIneo形成指示載體EGFP(Δ4AB)SEAP后表達(dá)產(chǎn)生。融合蛋白EGFP-NS4A/4B-SEAP依靠EGFP在細(xì)胞內(nèi)定位,在細(xì)胞內(nèi)有NS3/4A絲氨酸蛋白酶共表達(dá)的情況下,在NS4A/4B處發(fā)生切割作用,使得SEAP游離出來并通過其自身的信號肽分泌到細(xì)胞外,通過測定胞外SEAP活性便可反映出HCV NS3/4A絲氨酸蛋白酶的活性。利用本發(fā)明可以簡單、快速、靈敏而且可以定量指示絲氨酸蛋白酶活性,具有較高的實(shí)際應(yīng)用價值,在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。  
國際公布  
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