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人胚胎干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為肝細(xì)胞的方法

公開(公告)號(hào) CN101117626A  
公開(公告)日 2008.02.06  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200710118725.0  
申請(qǐng)日期 2007.07.12  
專利名稱 人胚胎干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為肝細(xì)胞的方法  
主分類號(hào) C12N5/08(2006.01)I  
分類號(hào) C12N5/08(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院野戰(zhàn)輸血研究所  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 裴雪濤;裴海云;王韞芳;楊印祥;習(xí)佳飛;施雙雙;劉雨瀟;南 雪;陳 琳;白慈賢  
地址 100850北京市海淀區(qū)太平路27號(hào)  
頒證日  
國際申請(qǐng)  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 魯 兵  
國省代碼 北京;11  
主權(quán)項(xiàng) 一種人胚胎干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為肝細(xì)胞的方法,采用以下步驟: 1)擴(kuò)增人胚胎干細(xì)胞; 2)形成成熟擬胚體; 3)將誘導(dǎo)的成熟擬胚體消化成單個(gè)細(xì)胞; 4)將單個(gè)細(xì)胞以條件培養(yǎng)液誘導(dǎo)分化,得到肝細(xì)胞。  
摘要 本發(fā)明提供一種人胚胎干細(xì)胞(hES)體外定向誘導(dǎo)分化為肝細(xì)胞的方法,首先利用hES細(xì)胞的高度自我更新和增殖的生物學(xué)特性,采用膠原酶IV消化法進(jìn)行傳代擴(kuò)增,獲得大量干細(xì)胞;再將hES細(xì)胞接種到低吸附性的細(xì)菌皿中形成成熟擬胚體(EB);然后將成熟的囊性EB用0.25胰酶-0.02%EDTA消化為單個(gè)細(xì)胞后接種到預(yù)先包被有I型膠原的組織培養(yǎng)皿,以含有地塞米松和人胰島素的條件誘導(dǎo)液培養(yǎng),并觀察鑒定其向肝細(xì)胞方向分化。本發(fā)明提供hES細(xì)胞高效分化為肝細(xì)胞的方法,同時(shí)此法使得后續(xù)的鑒定工作更加簡單、有效,為干細(xì)胞移植或生物人工肝治療重癥肝炎、肝衰竭等疾病奠定了基礎(chǔ)。  
國際公布  
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