公開(公告)號(hào)
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CN101117626A
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公開(公告)日
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2008.02.06
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN200710118725.0
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申請(qǐng)日期
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2007.07.12
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專利名稱
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人胚胎干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為肝細(xì)胞的方法
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主分類號(hào)
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C12N5/08(2006.01)I
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分類號(hào)
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C12N5/08(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院野戰(zhàn)輸血研究所
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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裴雪濤;裴海云;王韞芳;楊印祥;習(xí)佳飛;施雙雙;劉雨瀟;南 雪;陳 琳;白慈賢
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地址
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100850北京市海淀區(qū)太平路27號(hào)
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頒證日
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國際申請(qǐng)
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
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代理人
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魯 兵
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國省代碼
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北京;11
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主權(quán)項(xiàng)
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一種人胚胎干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為肝細(xì)胞的方法,采用以下步驟: 1)擴(kuò)增人胚胎干細(xì)胞; 2)形成成熟擬胚體; 3)將誘導(dǎo)的成熟擬胚體消化成單個(gè)細(xì)胞; 4)將單個(gè)細(xì)胞以條件培養(yǎng)液誘導(dǎo)分化,得到肝細(xì)胞。
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摘要
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本發(fā)明提供一種人胚胎干細(xì)胞(hES)體外定向誘導(dǎo)分化為肝細(xì)胞的方法,首先利用hES細(xì)胞的高度自我更新和增殖的生物學(xué)特性,采用膠原酶IV消化法進(jìn)行傳代擴(kuò)增,獲得大量干細(xì)胞;再將hES細(xì)胞接種到低吸附性的細(xì)菌皿中形成成熟擬胚體(EB);然后將成熟的囊性EB用0.25胰酶-0.02%EDTA消化為單個(gè)細(xì)胞后接種到預(yù)先包被有I型膠原的組織培養(yǎng)皿,以含有地塞米松和人胰島素的條件誘導(dǎo)液培養(yǎng),并觀察鑒定其向肝細(xì)胞方向分化。本發(fā)明提供hES細(xì)胞高效分化為肝細(xì)胞的方法,同時(shí)此法使得后續(xù)的鑒定工作更加簡單、有效,為干細(xì)胞移植或生物人工肝治療重癥肝炎、肝衰竭等疾病奠定了基礎(chǔ)。
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國際公布
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