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一種原位移植構(gòu)建人類肝癌小鼠模型的方法

公開(公告)號 CN101020066A  
公開(公告)日 2007.08.22  
申請(專利)號 CN200710013248.1  
申請日期 2007.01.19  
專利名稱 一種原位移植構(gòu)建人類肝癌小鼠模型的方法  
主分類號 A61K49/00(2006.01)I  
分類號 A61K49/00(2006.01)I;C12N5/08(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 山東大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 白增亮;王 澤;張敬平  
地址 250061山東省濟(jì)南市歷下區(qū)經(jīng)十路73號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 濟(jì)南金迪知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 王緒銀  
國省代碼 山東;37  
主權(quán)項(xiàng) 一種原位移植構(gòu)建人類肝癌小鼠模型的方法,步驟是: [1]人肝癌細(xì)胞株的培養(yǎng):選人肝癌細(xì)胞株常規(guī)傳代培養(yǎng),備用; [2]熒光染料DiI標(biāo)記的人肝癌細(xì)胞懸液的制備:選取上述對數(shù)生長期的人肝癌細(xì)胞株之一,與20μg/ml活體熒光染料DiI在37℃~38℃下共孵30min~60min,之后,0.25%無菌胰蛋白酶消化,以基本培養(yǎng)液收集細(xì)胞并調(diào)整細(xì)胞懸液濃度至0.5×106個/ml~1.0×109個/ml; [3]原位移植構(gòu)建人類肝癌小鼠模型:選用昆明種三日齡乳鼠,腹部皮膚消毒后,利用無菌30-gauge50-μl玻璃微量進(jìn)樣器,將10μl~50μl上述DiI標(biāo)記的人肝癌細(xì)胞懸液,直接移植入乳鼠肝葉內(nèi),建立人肝癌小鼠原位移植性模型; [4]模型鑒定。  
摘要 本發(fā)明公開了一種原位移植構(gòu)建人類肝癌小鼠模型的方法,即利用具有正常免疫功能的昆明種乳鼠作為荷瘤受體,于小鼠體外向鼠肝葉內(nèi)直接注射人肝癌細(xì)胞懸液,建立人肝癌細(xì)胞原位移植性荷瘤模型。本發(fā)明方法實(shí)施簡單,成功率高,基于本發(fā)明,可以在小鼠正常的機(jī)體免疫環(huán)境下,實(shí)時監(jiān)測肝癌細(xì)胞與小鼠免疫系統(tǒng)的相互作用,能夠非常真實(shí)地模擬人類體內(nèi)免疫耐受及抗腫瘤免疫的全過程,為免疫生物學(xué)藥物的篩選及藥理的研究提供更為理想的操作平臺。  
國際公布  
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