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均相熒光探針PCR結(jié)核桿菌檢測方法

公開(公告)號 CN1127575C  
公開(公告)日 2003.11.12  
申請(專利)號 CN99112336.0  
申請日期 1999.07.22  
專利名稱 均相熒光探針PCR結(jié)核桿菌檢測方法  
主分類號 C12Q1/04  
分類號 C12Q1/04;C12Q1/25;G01N33/50  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 廈門泰倫生物工程有限公司  
發(fā)明(設(shè)計)人 李慶閣;梁基選;欒國彥  
地址 361006福建省廈門市湖里區(qū)華昌路龍州大廈五樓  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 廈門市首創(chuàng)君合專利事務(wù)所有限公司  
代理人 張松亭  
國省代碼 福建;35  
主權(quán)項 一種均相熒光探針PCR結(jié)核桿菌檢測方法,采用PCR方法擴增結(jié)核桿菌(TB)基因序列,利用分子信標(biāo)與擴增產(chǎn)物雜交,并且測量反應(yīng)液的熒光強度,進行結(jié)果測定,其特征在于選擇的TB引物為結(jié)核桿菌插入序列IS986的一對引物:ISN-1:5’-CGT GAG GGC ATC GAG GTG GC-3’ISN-2:5’-GCG TAG GCG TCG GTG ACA AA-3’TB探針為:在兩引物擴增片段內(nèi)設(shè)計靶序列互補的寡核苷酸探針,5’端用FAM修飾,3’端用基修飾,并標(biāo)記DABCYL,其序列為:FAM-5’-GCG AGG AAC GGC TGA TGA CCA AAC TCT CGC-3’-DABCYL樣品熒光強度/陰性對照熒光強>2.0為陽性樣品熒光強度/陰性對照熒光強度<2.0為陰性。  
摘要 本發(fā)明根據(jù)結(jié)核桿菌(TB)基因序列,采用TB染色體插入序列IS986設(shè)計合成引物,用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)對TB特異性片段進行擴增,使用分子信標(biāo)探針與擴增產(chǎn)物雜交,作為結(jié)果測定的方法,通過熒光計直接測量反應(yīng)管的熒光強度,檢測標(biāo)本是否存在結(jié)核桿菌。  
國際公布  
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