| 公開(公告)號 | CN1465703A |
| 公開(公告)日 | 2004.01.07 |
| 申請(專利)號 | CN02120821.2 |
| 申請日期 | 2002.06.04 |
| 專利名稱 | 人甲狀旁腺激素基因突變體合成、表達(dá)、制備及應(yīng)用 |
| 主分類號 | C12P21/02 |
| 分類號 | C12P21/02;C07K14/635;C12N15/12;C12N15/63;A61K38/29;A61P19/10;A61P19/08;A61P3/00 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 北京雙鷺?biāo)帢I(yè)股份有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 徐明波;王勇波;崔鐵民;李亞軍;王紅麗 |
| 地址 | 100041 北京市石景山區(qū)八大處高科技園區(qū) |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項 | 一種制備人甲狀旁腺激素的方法，包括：(1)合成富含A、T的全基因；(2)將(1)得到的基因序列克隆到原核表達(dá)載體中；(3)用(2)所述的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化原核細(xì)胞得到工程菌；(4)通過發(fā)酵技術(shù)擴(kuò)增(3)中所得到的工程菌，得到人甲狀旁腺激素的高水平表達(dá)。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種重組人甲狀旁腺激素(Parathyriod Hormone，簡稱PTH)的制備方法。本發(fā)明利用遺傳密碼的兼并性，設(shè)計了大腸桿菌偏愛的密碼子，降低了DNA序列中的GC含量，合成了PTH的DNA序列。將PCR擴(kuò)增的人PTH基因與原核表達(dá)載體如pET22b組裝成高效表達(dá)質(zhì)粒，轉(zhuǎn)化大腸桿菌后用誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)PTH基因表達(dá)，表達(dá)量達(dá)到菌體總蛋白的25-30％。工程菌經(jīng)發(fā)酵擴(kuò)增，破碎后保留上清。上清經(jīng)處理后，進(jìn)行離子交換層析和凝膠排阻層析二步法純化產(chǎn)品。純品加保護(hù)劑后制成藥用凍干制劑。該制劑可用于由骨代謝病、骨質(zhì)疏松所引起的各類疾病的治療。 |
| 國際公布 |
