| 公開(公告)號 | CN1140633C |
| 公開(公告)日 | 2004.03.03 |
| 申請(專利)號 | CN00114063.9 |
| 申請日期 | 2000.02.03 |
| 專利名稱 | 一種缺失型人α珠蛋白基因的PCR檢測方法 |
| 主分類號 | C12Q1/68 |
| 分類號 | C12Q1/68 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國人民解放軍第一軍醫(yī)大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 徐湘民;肖維威;鐘雄霖;劉忠英 |
| 地址 | 510515 廣東省廣州市同和 |
| 頒證日 | 2004.03.03 |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 廣州科粵專利代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 余炳和 |
| 國省代碼 | 廣東;44 |
| 主權(quán)項 | 一種缺失型人α珠蛋白基因的PCR檢測方法，包括對人基因DNA待測樣品的PCR擴(kuò)增和對經(jīng)PCR擴(kuò)增后的產(chǎn)物進(jìn)行電泳分析，其特征在于采用4個引物P1、P2、P7、P4組成2對PCR反應(yīng)，該P(yáng)CR體系的引物設(shè)計方案為：(1)引物P1和P2組成一對擴(kuò)增-SEA/基因的引物，這2個引物分別位于該缺失基因5’斷裂點(diǎn)的上游和3’斷裂點(diǎn)的下游；引物P7、P4組成一對擴(kuò)增正常等位基因的引物，這2個引物的結(jié)合點(diǎn)均位于中國人常見的α地貧基因缺失區(qū)內(nèi)，即引物所在區(qū)域是--SEA/、-α3.7/和-α4.2/這三種基因的共同缺失點(diǎn)；(2)在每條引物的特異性基因序列的5’端連上一段由20個核苷酸組成的與人類基因不同源的高GC含量的序列，該20個核苷酸長度的寡核苷酸與特異性引物序列直接連接，其合成方式與普通引物相同，這樣，構(gòu)成此2重PCR體系的4個這種加長的寡核苷酸引物的5’端均含有一個共同尾序列。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供一種缺失型人α珠蛋白基因的PCR檢測方法，本發(fā)明采用4個(2對)引物P1、P2、P7、P4組成2對PCR反應(yīng)，分別針對正常等位基因和缺失等位基因(-SEA/基因)，提供了引物的設(shè)計方案和結(jié)果的解釋。根據(jù)本發(fā)明的新方案所建立的檢測-SEA缺失基因的方法，經(jīng)實(shí)驗證實(shí)可在同一試管內(nèi)同時實(shí)現(xiàn)2對特異性PCR引物的擴(kuò)增，且有很好的重復(fù)性。本方法除提供-SEA缺失基因檢測信息外，還能一次檢測提供多種有價值的特定α珠蛋白基因缺失的信息。 |
| 國際公布 |
