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分泌人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)的大腸桿菌菌株

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1156575C  
公開(kāi)(公告)日 2004.07.07  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN01800753.8  
申請(qǐng)日期 2001.03.31  
專利名稱 分泌人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)的大腸桿菌菌株  
主分類號(hào) C12N15/70  
分類號(hào) C12N15/70;C12N1/21;C07K14/535  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2000.3.31 KR 2000/17052  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 韓國(guó)科學(xué)技術(shù)院  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 李相燁;丁基峻  
地址 韓國(guó)大田廣域市  
頒證日 2004.07.07  
國(guó)際申請(qǐng) PCT/KR2001/000549 2001.3.31  
進(jìn)入國(guó)家日期 2001.11.30  
專利代理機(jī)構(gòu) 中原信達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司  
代理人 丁業(yè)平;王維玉  
國(guó)省代碼 韓國(guó);KR  
主權(quán)項(xiàng) 重組質(zhì)粒載體,包括:卡那霉素抗性基因;啟動(dòng)子;木聚糖內(nèi)切酶信號(hào)序列;編碼SEQ ID NO:1的寡肽的核苷酸序列;和人粒細(xì)胞集落刺激因子(hG-CSF)基因。  
摘要 本發(fā)明提供了含有卡那霉素抗性基因、啟動(dòng)子、木聚糖內(nèi)切酶信號(hào)序列、編碼由含6個(gè)連續(xù)組酸殘基的13個(gè)氨基酸組成的寡肽的核苷酸序列和人粒細(xì)胞集落刺激因子(hG-CSF)基因的重組質(zhì)粒載體;以及用所述載體轉(zhuǎn)化的大腸桿菌;以及以高純度從所述微生物分泌的蛋白庫(kù)中生產(chǎn)完整hG-CSF蛋白的方法。根據(jù)本發(fā)明,通過(guò)促進(jìn)大量hG-CSF融合蛋白分泌到周質(zhì)中的相當(dāng)簡(jiǎn)單的方法可以高純度制備hG-CSF蛋白,所述方法不需要復(fù)雜的加工過(guò)程例如對(duì)于通過(guò)常規(guī)技術(shù)分離胞質(zhì)中產(chǎn)生的作為不溶性包函體的hG-CSF所需的溶解和隨后再折疊,因此,在開(kāi)發(fā)用于抗癌治療的補(bǔ)充藥物的過(guò)程中可用hG-CSF蛋白廣泛地作為活性成分。  
國(guó)際公布 WO2001/073081 英 2001.10.4  
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