公開(公告)號 | CN1566325A |
公開(公告)日 | 2005.01.19 |
申請(專利)號 | CN03126246.5 |
申請日期 | 2003.07.09 |
專利名稱 | 0157:H7出血性大腸桿菌變異株的制取方法 |
主分類號 | C12N1/20 |
分類號 | C12N1/20;A61K39/108;C12Q1/04;//(C12N1/20,C12R1∶19) |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權 | |
申請(專利權)人 | 李迅 |
發(fā)明(設計)人 | 李迅 |
地址 | 450003河南省鄭州市緯五路東段47號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構 | 鄭州天陽專利事務所 |
代理人 | 聶孟民 |
國省代碼 | 河南;41 |
主權項 | 一種0157:H7出血性大腸桿菌變異株的制取方法,其特征在于是將0157:H7出血性大腸桿菌增菌于由蛋白粉10克、氯化鈉10克和酵母粉5克加水1000ml制成的LB肉湯中,在37℃培養(yǎng)4-6小時,增殖細菌濃度為107cfu/ml,然后用該濃度的肉湯含菌液口服接種于動物模型,動物接種48小時后發(fā)生腹瀉,取動物腹瀉中的糞便加入LB肉湯中,在37℃下增殖6-18小時,糞便加入量為每5ml的LB肉湯中加0.1-2克,增殖后的含菌液劃線接種于細菌分離平板,在37℃培養(yǎng)18-24小時,挑選菌落,接種克氏雙糖和MIU生化培養(yǎng)管內(nèi),然后作血清凝集試驗,或用PCR測定菌株的毒力基因。 |
摘要 | 本發(fā)明是一種0157:H7出血性大腸桿菌變異株的制取方法,可有效地解決為防治出血性大腸桿菌感染所致嚴重并發(fā)癥的疫苗問題,另為臨床診斷和治療提供了病原和動物模型;其實現(xiàn)的技術方案是用標準的出血性大腸桿菌增菌于LB肉湯中,生成含菌液,該菌液口服接種于動物模型,動物腹瀉過程中,取其糞便再加入LB肉湯中,增殖培養(yǎng),然后將細菌接種于分離平板上,培養(yǎng)后挑選菌落,接種克氏雙糖和MIU生化管,或用生化儀測定細菌生化特征,再作血清凝集診斷;本發(fā)明不但提供了一種出血性大腸桿菌變異株的制備方法,而且確定獲得了出血性大腸桿菌的變異株,同時也確定了能模擬人感染出血性大腸桿菌后而導致嚴重疾病的動物模型,它將有利疫苗的制備和臨床治療問題,是醫(yī)學上的一大發(fā)明,其推廣應用,必造福于人類。 |
國際公布 |