公開(公告)號
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CN1609115A
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公開(公告)日
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2005.04.27
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申請(專利)號
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CN200310100190.6
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申請日期
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2003.10.17
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專利名稱
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一種高效表達(dá)重組蜱抗凝肽的生產(chǎn)方法
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主分類號
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C07H21/00
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分類號
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C07H21/00;C12N15/81;C12N15/09;C07K14/435
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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北京華特森基因科技有限公司
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發(fā)明(設(shè)計)人
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鄭海發(fā);張永國;張俊;秦永發(fā)
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地址
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100071北京市豐臺西路15號華北物質(zhì)供應(yīng)站院內(nèi)31號房
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國省代碼
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北京;11
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主權(quán)項(xiàng)
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一段選自下列物質(zhì)組之一的寡核苷酸序列,其可用作引物擴(kuò)增出重組蜱抗凝肽的基因序列:①P1:TCTCGAGAAAAGATGGAATAGGCTGTGTATTAAGCCTAGAAGATGGATTGATGAGT;②P2:TGGAATAGGCTGTGTATTAAGCCTAGAAGATGGATTGATGAGTGTGATAGTAATGA;③P3:CACAACCACCTTTACCGTTACGAAAATAGGCTCTTTCACCCCCTTCATTACTATCACACTC;④P4:TAAAGGTGGTTGTGATTCCTTTTGGATCTGTCCGGAAGACCATACCGGTGCTGACTAT;⑤P5:GATGCAAGCGTTGAAGCAGTCACGGTAGGAGGAGTAATAGTCAGCACCGGT。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種在酵母中高效表達(dá)重組蜱抗凝肽的方法,包括:設(shè)計引物合成重組蜱抗凝肽的編碼基因;融合于酵母表達(dá)調(diào)控元件,構(gòu)建甲醇酵母高表達(dá)工程菌;運(yùn)用甘油培養(yǎng)和誘導(dǎo)表達(dá)二步生長法,在酵母中高密度發(fā)酵表達(dá)重組蜱抗凝肽;采用超濾、離子交換、分子篩柱層析等純化技術(shù)的順序組合,大量純化回收重組蜱抗凝肽。本發(fā)明的方法能夠大量生產(chǎn)重組蜱抗凝肽,產(chǎn)品能夠達(dá)到藥用標(biāo)準(zhǔn)。
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國際公布
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