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從新的融合蛋白制造重組胰島素的方法

公開(公告)號 CN1213146C  
公開(公告)日 2005.08.03  
申請(專利)號 CN00806934.4  
申請日期 2000.04.26  
專利名稱 從新的融合蛋白制造重組胰島素的方法  
主分類號 C12N15/17  
分類號 C12N15/17;C12N15/03;C07K19/00;C07K14/575  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權 1999.4.30 JP 124877/1999  
申請(專利權)人 伊藤火腿株式會社  
發(fā)明(設計)人 岡周作;佐藤靜治;東久邇真彥;近藤雅昭;;工藤季之;渡邊重明;脅能宏;結城寬孝  
地址 日本兵庫  
頒證日  
國際申請 PCT/JP2000/002736 2000.4.26  
進入國家日期 2001.10.30  
專利代理機構 中原信達知識產權代理有限責任公司  
代理人 丁業(yè)平;王維玉  
國省代碼 日本;JP  
主權項 編碼下式(I)所示融合蛋白的DNA:[Y]-[X1]-[B-鏈]-[X2]-[連接物]-[X3]-[A-鏈](式I)其中Y是用于蛋白質的表達和分泌的引導肽序列,包含來自芽孢桿菌屬細菌的細胞壁蛋白(CWP)之一的MWP蛋白的N末端的9個基酸殘基;X1是可用凝血酶酶切的氨基酸序列;B-鏈是胰島素B鏈的氨基酸序列;X2是可用凝血酶酶切的氨基酸序列;連接物是具有至少一個氨基酸殘基的連接序列;X3是可用凝血酶酶切的氨基酸序列;以及A-鏈是胰島素A鏈的氨基酸序列;并且Y、X1、B-鏈、X2、連接物、X3和A-鏈按照式I所示的順序連接。  
摘要 本發(fā)明公開了編碼下式(I)所示融合蛋白的DNA以及采用含有該DNA的表達體系生產胰島素的方法,所述融合蛋白含有:用于蛋白質的表達和分泌的包含至少一個氨基酸殘基的引導肽序列[Y]、被用來酶切或者化學裂解的氨基酸序列[X1]、胰島素B鏈的氨基酸序列[B-鏈]、被用來酶切的氨基酸序列[X2]、具有至少一個氨基酸殘基的連接序列[連接物]、被用來酶切的氨基酸序列[X3]以及胰島素A鏈的氨基酸序列[A-鏈]并且他們的連接順序為[Y]-[X1]-[B-鏈]-[X2]-[連接物]-[X3]-[A-鏈](式I)。因此提供了可高生產率地生產基因重組胰島素的方法。  
國際公布 WO2000/066738 日 2000.11.9  
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