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乙型肝炎病毒突變位點(diǎn)的肽核酸檢測芯片及其制備方法

公開(公告)號 CN1236070C  
公開(公告)日 2006.01.11  
申請(專利)號 CN02135626.2  
申請日期 2002.10.14  
專利名稱 乙型肝炎病毒突變位點(diǎn)的肽核酸檢測芯片及其制備方法  
主分類號 C12Q1/68(2006.01)I  
分類號 C12Q1/68(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 山東省醫(yī)藥生物技術(shù)研究中心  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 韓金祥;魯艷芹  
地址 250062山東省濟(jì)南市經(jīng)十路89號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 濟(jì)南三達(dá)專利事務(wù)所  
代理人 李健康  
國省代碼 山東;37  
主權(quán)項(xiàng) 一種乙型肝炎病毒突變位點(diǎn)的肽核酸檢測芯片,包括基片和陣列式分布的肽核酸探針與對照的點(diǎn)涂層,所述的基片是玻璃基片,尼龍膜之一,其特征在于,所述的基片是未經(jīng)任何修飾的玻璃裸片、醛基化玻璃片和基化玻片之一,所述的肽核酸探針與對照的點(diǎn)涂層是指在基片上均勻分布的,包括乙肝前核心抗原區(qū)(前C區(qū))和表面抗原區(qū)(S區(qū))已知突變位點(diǎn)和野生位點(diǎn)的24條肽核酸檢測探針,2條陽性肽核酸探針,1條陰性探針及空白點(diǎn)樣液對照,其中,所述24條肽核酸檢測探針的序列結(jié)構(gòu)分別是,S1:ACATAGAGGTTCCTTGA-O-連接子,S2:ACATAGAGATTCCTTGA-O-連接子,S3:GGGAAACATAGAGGTTC-O-連接子,S4:GGGAAACACAGAGGTTC-O-連接子,S5:AGGGAAACATAGAGGTT-O-連接子,S6:AGGGAAACGTAGAGGTT-O-連接子,S7:GTTTCCGTCCGAAGG-O-連接子,S8:GTTTCCGGCCGAAGG-O-連接子,S9:CAGTTTCCGTCCGAA-O-連接子,S10:CAGTTTCTGTCCGAA-O-連接子,C1:ACAAAGACCTTTAACCTA-O-連接子,C2:ACAAAGATCATTAACCTA-O-連接子,C3:GAACAGTAGGACATGA-O-連接子,C4:GAACAGTGGGACATGA-O-連接子,C5:GCTTGAACAGTAGGAC-O-連接子,C6:GCTTGAAAAGTAGGAC-O-連接子,C7:CATGCCCCAAAGCCA-O-連接子,C8:CATGCCCTAAAGCCA-O-連接子,C9:CCATGCCCCAAAGC-O-連接子,C10:CCATGCTCCAAAGC-O-連接子,C11:GTCCATGCCCCAAAG-O-連接子,C12:GTCCATGTCCCAAAG-O-連接子,C13:ATGTCCACGCCCCAA-O-連接子,C14:ATGTCCATGCCCCAA-O-連接子;所述2條陽性肽核酸探針的序列結(jié)構(gòu)分別是,PCS:TGGGATGGGAATACA-O-連接子,PCC:ATGCCTACAGCCTCC-O-連接子;所述陰性探針的序列結(jié)構(gòu)是,NC:GAGCAACTGTACCAAGA-O-連接子;所述的肽核酸檢測探針與對照的點(diǎn)涂層的大小是:當(dāng)點(diǎn)直徑為100μm,點(diǎn)間距為300μm時,肽核酸陣列的大小為1.6mm×1.6mm。  
摘要 本發(fā)明公開了一種乙型肝炎病毒突變位點(diǎn)的肽核酸檢測芯片及其制備方法,芯片包括基片和陣列式分布的肽核酸探針與對照的點(diǎn)涂層,基片是玻璃基片,尼龍膜之一;肽核酸探針與對照的點(diǎn)涂層是指含有乙肝前核心抗原區(qū)和表面抗原區(qū)已知突變位點(diǎn)和野生位點(diǎn)的24條檢測探針,2條陽性對照探針,1條陰性對照探針及空白點(diǎn)樣液對照;乙肝病毒DNA樣品的PCR擴(kuò)增利用帶有T3啟動子的引物,PCR產(chǎn)物經(jīng)體外轉(zhuǎn)錄進(jìn)行熒光標(biāo)記,所得單鏈RNA經(jīng)片段化與肽核酸芯片雜交,由雜交信號的強(qiáng)弱來分析突變位點(diǎn)。本芯片同時平行檢測乙肝前核心抗原區(qū)和表面抗原區(qū)已知的突變位點(diǎn),具有快速、高效、診斷精確的特點(diǎn)。  
國際公布  
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