| 公開(公告)號 | CN1244691C |
| 公開(公告)日 | 2006.03.08 |
| 申請(專利)號 | CN200410014095.9 |
| 申請日期 | 2004.02.18 |
| 專利名稱 | 自體胸水上清培養(yǎng)TIL細(xì)胞的方法 |
| 主分類號 | C12N5/08(2006.01)I |
| 分類號 | C12N5/08(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 劉寶瑞;鄒征云 |
| 地址 | 210008江蘇省南京市中山路321號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 南京蘇科專利代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 孫 鷗 |
| 國省代碼 | 江蘇;32 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 自體胸水上清培養(yǎng)TIL細(xì)胞的方法，無菌收集癌性胸水，離心后保存上清，用淋巴細(xì)胞分離液分離下層細(xì)胞，去除下層細(xì)胞中的紅細(xì)胞、壞死組織碎片，其特征在于(1)將上清留作培養(yǎng)基；(2)取下層細(xì)胞中的白膜層細(xì)胞至上清培養(yǎng)基培養(yǎng)；(3)12～24小時(shí)后，腫瘤細(xì)胞全部貼壁，懸浮的是TIL細(xì)胞；(4)將濃度在5×105/ml～1×106/ml的TIL細(xì)胞置于飽和濕度、5％二氧化碳孵箱內(nèi)培養(yǎng)，溫度控制在37℃內(nèi)；(5)1天后，加入終濃度50～100ng/ml的OKT3、800～6000U/ml的IL-2、50～100ug/ml的PHA；(6)隔1～2天，加入含800～6000U/ml的IL-2的完全培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種利用自體胸水上清進(jìn)行TIL細(xì)胞的培養(yǎng)方法。本發(fā)明采用將收集的癌性胸水離心后保存上清，用作培養(yǎng)基，將下層細(xì)胞中的白膜層細(xì)胞至該上清培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得懸浮的TIL細(xì)胞，再至孵箱內(nèi)培養(yǎng)，1天后加入OKT3、IL-2、PHA等，1、2天再加入IL-2進(jìn)行培養(yǎng)。本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明該方法是可行的，與現(xiàn)有方法相比，某些方面相同，某些方面更優(yōu)。而本發(fā)明卻避免了現(xiàn)有方法使用人AB血清可能導(dǎo)致的乙肝、愛滋病等傳染，體外培養(yǎng)時(shí)間過長所增加的污染機(jī)率，以及培養(yǎng)時(shí)間過長增加病人負(fù)擔(dān)，延長治療時(shí)間和成本增加等缺陷。 |
| 國際公布 |
