公開(公告)號
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CN1312277C
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公開(公告)日
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2007.04.25
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申請(專利)號
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CN200410018070.6
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申請日期
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2004.04.29
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專利名稱
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一種誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞定向分化的方法
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主分類號
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C12N5/08(2006.01)I
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分類號
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C12N5/08(2006.01)I;A61P25/00(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院
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發(fā)明(設(shè)計)人
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鐘春玖;劉康達(dá);王志軍
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地址
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200032上海市醫(yī)學(xué)院路136號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海正旦專利代理有限公司
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代理人
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包兆宜
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項
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一種誘導(dǎo)動物骨髓基質(zhì)細(xì)胞定向分化的方法,其特征是,在無血清條件下,采用神經(jīng)節(jié)苷脂誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞定向分化為神經(jīng)干細(xì)胞、神經(jīng)前體細(xì)胞或神經(jīng)細(xì)胞,包括下述步驟,1)骨髓基質(zhì)細(xì)胞分離、純化和培養(yǎng)以及誘導(dǎo)向第四~六代動物骨髓基質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)液中添加0.01~100mMol/L的神經(jīng)節(jié)苷脂,進(jìn)行誘導(dǎo);2)MSCs和誘導(dǎo)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察;3)免疫細(xì)胞化學(xué)染色誘導(dǎo)細(xì)胞分別用巢蛋白、NSE、GFAP抗體進(jìn)行細(xì)胞免疫熒光染色。
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摘要
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本發(fā)明屬生物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞定向分化為神經(jīng)干細(xì)胞、神經(jīng)前體細(xì)胞或神經(jīng)細(xì)胞的方法。本發(fā)明方法通過骨髓基質(zhì)細(xì)胞分離、純化和培養(yǎng),及誘導(dǎo)、分化,經(jīng)形態(tài)學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)染色證明,采用腦源性膜信號相關(guān)物質(zhì)—神經(jīng)節(jié)苷脂能高比例地誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞定向分化為神經(jīng)干細(xì)胞、神經(jīng)前體細(xì)胞或神經(jīng)細(xì)胞誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞。經(jīng)誘導(dǎo)后的神經(jīng)前體(干)細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞經(jīng)靜脈輸注移植或腦內(nèi)移植具有治療帕金森病或綜合征、中風(fēng)及其后遺癥、脊髓損傷及其后遺癥、阿爾茨海默病(老年性癡呆)等作用。具有廣泛臨床應(yīng)用前景。
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國際公布
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