| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1782067A |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2006.06.07 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200510057295.7 |
| 申請(qǐng)日期 | 2005.09.27 |
| 專利名稱 | 采用GS115酵母菌合成重組人腸三葉因子的工藝 |
| 主分類號(hào) | C12N1/19(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N1/19(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國(guó)人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 彭 曦;孫 勇;汪仕良;黃躍生 |
| 地址 | 400038重慶市沙坪壩區(qū)高灘巖正街29號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 重慶市恒信專利代理有限公司 |
| 代理人 | 盛元坤 |
| 國(guó)省代碼 | 重慶;85 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種采用GS115酵母菌合成重組人腸三葉因子的工藝，包括目的基因的獲取、酵母表達(dá)載體的構(gòu)建、酶切及測(cè)序鑒定、誘導(dǎo)表達(dá)和純化過(guò)程，其特征是在酶切及測(cè)序鑒定之后還有一個(gè)轉(zhuǎn)化入GS115酵母菌的過(guò)程：將重組質(zhì)粒線性化，然后化學(xué)轉(zhuǎn)化入GS115酵母菌，再進(jìn)行抗性篩選，將篩選出的陽(yáng)性克隆分別轉(zhuǎn)接到MMH、MDH平板上獲得陽(yáng)性克隆Mut+表型。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及基因工程的DNA或RNA、載體和質(zhì)粒，或其分離、制備或純化。是一種采用GS115酵母菌合成重組人腸三葉因子的工藝：包括目的基因的獲取、酵母表達(dá)載體的構(gòu)建、酶切及測(cè)序鑒定、轉(zhuǎn)化入GS115酵母菌、誘導(dǎo)表達(dá)和純化六步過(guò)程。按照本發(fā)明表達(dá)方法獲得的重組人腸三葉因子，表達(dá)產(chǎn)量可達(dá)100mg/L，提純純度可達(dá)95％或更高，純化的蛋白產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)結(jié)果表明：用本發(fā)明表達(dá)方法獲得的重組人腸三葉因子為高純度、無(wú)熱源、無(wú)內(nèi)毒素，有正確的分子量，與天然的腸三葉因子有相同的等電點(diǎn)、氨基酸序列和紫外光譜，及其完好的生物學(xué)活性的重組蛋白。它在治療由各種致傷因子引起的胃腸粘膜損傷等方面具有顯著效果。 |
| 國(guó)際公布 |
