公開(公告)號
|
CN1268751C
|
公開(公告)日
|
2006.08.09
|
申請(專利)號
|
CN03137202.3
|
申請日期
|
2003.05.26
|
專利名稱
|
表達(dá)人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子的酵母重組株及rhGM-CSF的純化方法
|
主分類號
|
C12N15/63(2006.01)I
|
分類號
|
C12N15/63(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/27(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K14/535(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N
|
分案原申請?zhí)? |
|
優(yōu)先權(quán)
|
|
申請(專利權(quán))人
|
海南國棟藥物研究所有限公司
|
發(fā)明(設(shè)計(jì))人
|
梁國棟;周 鵬;夏中寧;蒲廣西;陳海寧
|
地址
|
570216海南省海口市金盤工業(yè)區(qū)金盤路17號嘉海大廈三樓
|
頒證日
|
|
國際申請
|
|
進(jìn)入國家日期
|
|
專利代理機(jī)構(gòu)
|
|
代理人
|
|
國省代碼
|
海南;66
|
主權(quán)項(xiàng)
|
一種表達(dá)重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子的分泌型表達(dá)載體,其特征在于,該載體含有:重組的rhGM-CSF序列,其被插入pGAPZα-A之GAP啟動子/α-factor信號肽下游位點(diǎn)Xhoi/Xbai,同時刪除Kex2位點(diǎn)之后的Glu-Ala-Glu-Ala編碼序列和啟始密碼子ATG,構(gòu)建成rhGM-CSF分泌型表達(dá)載體。
|
摘要
|
本發(fā)明公開了一種重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的分泌型表達(dá)載體和一種簡易純化方法,用該分泌型表達(dá)載體轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞,以及用上述表達(dá)載體的畢赤氏酵母重組工程菌株發(fā)酵表達(dá)rhGM-CSF的方法。本發(fā)明采用酵母分泌表達(dá)系統(tǒng)取代大腸桿菌包涵體表達(dá)系統(tǒng),目標(biāo)蛋白rhGM-CSF不需要復(fù)性,其生物比活性可達(dá)到3.4×107單位/毫克蛋白,低毒副作用;因此,本發(fā)明的方法制得的rhGM-CSF不僅產(chǎn)率高,而且純化工藝簡便、成本低、產(chǎn)品毒副作用低。
|
國際公布
|
|