公開(公告)號
|
CN1295330C
|
公開(公告)日
|
2007.01.17
|
申請(專利)號
|
CN200510038289.7
|
申請日期
|
2005.01.25
|
專利名稱
|
抗病毒活性重組雞γ-干擾素rChIFN-γ的制取方法及用途
|
主分類號
|
C12N15/09(2006.01)I
|
分類號
|
C12N15/09(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N15/23(2006.01)I;A61K38/21(2006.01)I
|
分案原申請?zhí)? |
|
優(yōu)先權
|
|
申請(專利權)人
|
揚州大學
|
發(fā)明(設計)人
|
秦愛建;許金俊;孔桂美;劉岳龍;金文杰
|
地址
|
225009江蘇省揚州市大學南路88號
|
頒證日
|
|
國際申請
|
|
進入國家日期
|
|
專利代理機構
|
揚州市錦江專利事務所
|
代理人
|
江 平
|
國省代碼
|
江蘇;32
|
主權項
|
抗病毒活性重組雞γ-干擾素rChIFN-γ的制取方法,其特征在于由以下步驟組成: a、將ChIFN-γ基因從真核質粒pcDNA-ChIFN-γ中用EcoR I和Not I雙酶切后克隆到轉移載體pFASTBAC1中,獲得重組轉移質粒pFASTBAC1-ChIFN-γ; b、取DH10Bac感受態(tài)細胞,加入1ng pFASTBAC1-ChIFN-γ,轉座后,用SOC培養(yǎng)基10倍梯度稀釋培養(yǎng)物,各取100μl涂布Luria平板,37℃培養(yǎng)24~48小時,挑取白色菌落,Luria平板進行四次篩選純化,陽性質粒命名為Bacmid-ChIFN-γ,提取出陽性質粒DNA用于下一步轉染; c、取上述陽性質粒Bacmid-ChIFN-γDNA轉染Sf9細胞。
|
摘要
|
抗病毒活性重組雞γ-干擾素的制取方法及用途,涉及一種廣譜高效抗病毒基因工程產品的制取方法。將ChIFN-γ基因從真核質粒中經雙酶切后克隆到轉移載體中,獲得重組轉移質粒pFASTBACl-ChIFN-γ;取DH10Bac感受態(tài)細胞,加入1ng pFASTBACl-ChIFN-γ,轉座后,用SOC培養(yǎng)基稀釋培養(yǎng)物,涂布Luria平板,培養(yǎng)后,挑取白色菌落,Luria平板進行純化,陽性質粒命名為Bacmid-ChIFN-γ,提取陽性質粒DNA;取上述陽性質粒DNA轉染Sf9細胞,制得高抗病毒活性重組雞γ-干擾素。本發(fā)明還在于將該干擾素用于抑制MDV GA對CEF的致病變作用、抑制NDV F48E8在細胞上的增殖、抗AIV(H5N1)病毒對細胞的致病作用。
|
國際公布
|
|