| 公開(公告)號 | CN1308318C |
| 公開(公告)日 | 2007.04.04 |
| 申請(專利)號 | CN200410060963.7 |
| 申請日期 | 2004.10.15 |
| 專利名稱 | 利用離體植株組織生產(chǎn)紫杉醇的方法 |
| 主分類號 | C07D305/14(2006.01)I |
| 分類號 | C07D305/14(2006.01)I;A01H4/00(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 華中科技大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 余龍江;劉 智;趙春芳;付春華;楊 英;楊 秦;李麗琴 |
| 地址 | 430074湖北省武漢市洪山區(qū)珞喻路1037號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 華中科技大學(xué)專利中心 |
| 代理人 | 方 放 |
| 國省代碼 | 湖北;42 |
| 主權(quán)項 | 利用離體植株組織生產(chǎn)紫杉醇的方法，依序包括下述步驟：(1)選擇春秋季節(jié)，采摘當(dāng)年生紅豆杉新鮮枝葉；(2)預(yù)處理：清洗去除新鮮枝葉中雜質(zhì)，晾干，裁剪其長度至20-40cm；(3)將裁剪后的紅豆杉枝葉扦插于無菌固體改良MS培養(yǎng)基上、或者將剪碎后的紅豆杉枝葉培養(yǎng)于無菌液體改良MS培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基中添加藥劑抑制雜菌污染，培養(yǎng)環(huán)境條件黑暗、蔭涼、干凈；(4)上述步驟(3)培養(yǎng)過程的同時誘導(dǎo)處理：分別采用真菌誘導(dǎo)子，稀土元素或化學(xué)誘導(dǎo)劑對外植體誘導(dǎo)，扦插培養(yǎng)3-6天，剪碎培養(yǎng)1-3天；(5)上述步驟(3)培養(yǎng)過程的同時在培養(yǎng)基中添加紫杉醇生物合成的前體物質(zhì)；(6)對經(jīng)過前述培養(yǎng)、誘導(dǎo)、前體添加的紅豆杉枝葉采用常規(guī)方法低溫粉碎、有機(jī)溶劑浸提，得到紫杉醇浸提物； 所述步驟(4)中，真菌誘導(dǎo)子為紅豆杉樹皮中分離得到內(nèi)生的黑曲霉、青霉菌、鏈霉菌、酵母或赤霉菌的細(xì)胞壁多糖提取物其中的一種，濃度為50mg/L；稀土元素為硝酸鑭、硫酸鈰銨、硝酸亞鈰其中的一種，濃度為2mg/L；化學(xué)誘導(dǎo)劑為下述的一種或兩種：茉莉酸甲酯、濃度為100μmol/L，茉莉酸、濃度為100μmol/L，水楊酸、濃度為80mg/L，矮壯素、濃度為10mg/L，乙烯利、濃度為1-5mg/L； 所述步驟(5)中，添加的前體物質(zhì)分別為下述的一種：苯丙氨酸、濃度為2mmol/L，苯甲酸鈉、濃度為0.5mmol/L，醋酸鈉、濃度為2mmol/L，甘氨酸、濃度為0.1mmol/L。 |
| 摘要 | 利用離體植株組織生產(chǎn)紫杉醇的方法，屬于生產(chǎn)藥物的生物方法，具體涉及利用紅豆杉科植株枝葉生產(chǎn)紫杉醇的方法，解決目前紅豆杉枝葉采摘后直接提取的缺點，目的是提高采摘紅豆杉枝葉中紫杉醇含量。本發(fā)明依序包括下述步驟：(1)選擇季節(jié)采摘當(dāng)年生紅豆杉新鮮枝葉；(2)清洗、晾干并合理裁剪；(3)在黑暗、蔭涼和外加營養(yǎng)條件下通過扦插或枝葉剪碎后組織培養(yǎng)；(4)培養(yǎng)的同時對外植體誘導(dǎo)處理；(5)培養(yǎng)過程的同時在培養(yǎng)基中添加紫杉醇生物合成的前體物質(zhì)；(6)采用常規(guī)方法低溫粉碎、有機(jī)溶劑浸提，得到紫杉醇浸提物。本發(fā)明大大提高紫杉醇的產(chǎn)量，降低前體物的含量，產(chǎn)品易于回收，無污染物排放。 |
| 國際公布 |
