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馬兜鈴-馬兜鈴酸A的含量測定方法-HPLC

  
方法名稱:
  兜鈴-馬兜鈴酸A的含量測定-HPLC
應(yīng)用范圍:
  用于馬兜鈴中馬兜鈴酸A的含量測定
方法原理:
 本品粉末加10 %甲酸丙酮液沙氏提取,經(jīng)液相色譜分離,在315 nm處測定峰面積,外標法計算含量
儀器設(shè)備及實驗條件:
 

儀器    島津LC-6A高效液相色譜儀(日本島津公司);SPD-10AVP/ 10AVVP紫外檢測器(日本島津公司);LC-10ATVP溶劑輸送泵(日本島津公司);N3000工作站

色譜條件   色譜柱:C18(150 mm×4.6 mm,5 μm);流動相:甲醇-水-乙酸(70∶28∶2);流速:1.0 mL/min;檢測波長:315 nm;柱溫:25 ℃
試樣制備:
 

對照品溶液的制備   精密稱取在五化二磷減壓干燥12 h至恒重的馬兜鈴酸A 2 mg左右,置于25 mL量瓶中,用乙醇溶解并稀釋至刻度,即得。

供試品溶液的制備   精密稱取在五氧化二磷減壓干燥12 h至恒重的樣品粉末(40目) 1. 5 g于150 mL沙氏提取器中,以10 %甲酸丙酮液150 mL為溶劑,在80 ℃水浴中提取4 h,提取液蒸干,用0. 5 %氫氧化鈉溶液使其完全溶解并移至分液漏斗中,用乙醚萃取2次,每次15 mL,萃取后的堿液,用3.5 %鹽酸酸化至pH=2,再用乙醚萃取4次,60 ℃下減壓干燥4 h的黃芩苷對照品適量,加70 %乙醇溶解并定量稀釋制成0.1 mg/mL的溶液,即得。
操作步驟:
  分別精密吸取馬兜鈴酸A對照液以及馬兜鈴供試品溶液適量,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標法計算馬兜鈴酸A含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:m.f1411.cn)
備注:
 
參考文獻:
  王寶慶,高文遠. 高效液相色譜法測定馬兜鈴中馬兜鈴酸A的含量.中國林副特產(chǎn). 2007,18(2):23~24
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