含紅參制劑—益氣復(fù)脈口服液—紅參的含量測定方法—HPLC-UV

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方法名稱：

含紅參制劑—益氣復(fù)脈口服液—紅參的含量測定—HPLC-UV

應(yīng)用范圍：

用于測定益氣復(fù)脈口服液中紅參的含量

方法原理：

本品先后用三氯甲烷脫脂，過大孔吸附樹脂后，收集70%乙醇洗脫液，再過C18小柱，收集甲醇洗脫液經(jīng)液相色譜儀分離，在203nm處測定，按外標(biāo)法計(jì)算含量。

儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件：

儀器設(shè)備島津LC-2010 型高效液相色譜儀。

色譜條件色譜柱：YMC ODSA柱（150mm×4.5mm，5μm)；柱溫：25℃；流動相：乙腈為流動相A，水為流動相B，按表1進(jìn)行梯度洗脫：流速：1.0ml/min，檢測波長：203nm。

表1　梯度洗脫條件

時(shí)間(min)	流動相A (% )	流動相B (% )
0～5	19	81
5～21	19→23	81→77
21～40	23→35	77→65
40～42	35→65	65→35
42～47	65	35
47～49	65→19	35→81

試樣制備：

對照品溶液的制備　分別精密稱取人參皂苷Rb1、Re、Rg1對照品適量，加甲醇使溶解并制成人參皂苷Rb1 1.002 mg/ml的溶液，人參皂Re11.047 mg/ml及人參皂苷Rg1 1.002mg/ml的混合對照品溶液。

供試品溶液的制備　取本品30ml，用三氯甲烷30ml振搖提取，靜置使分層，棄去三氯甲烷溶液，精密量取10ml，通過已處理好的大孔樹脂柱(D101型，柱內(nèi)徑1. 5 cm，高10 cm，用20%乙醇溶液預(yù)洗)上，用20%乙醇溶液50 ml洗脫，洗脫液棄去，再用70%乙醇溶液100ml洗脫，收集70%乙醇洗脫液，蒸干，殘?jiān)?0%甲醇溶液溶解并轉(zhuǎn)移至10 ml量瓶中，稀釋至刻度，搖勻。精密量取2ml，通過C18小柱(0.5g，用20%甲醇溶液預(yù)洗)，用20%甲醇溶液10ml洗脫，棄去，再用甲醇20ml洗脫，收集甲醇洗脫液，蒸干，殘?jiān)眉状既芙獠⒍哭D(zhuǎn)移至5 ml量瓶內(nèi)，稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜( 0. 45μm)濾過，取續(xù)濾液，即得。

操作步驟：

分別精密吸取混合對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，按上述色譜條件，測定峰面積，以外標(biāo)法計(jì)算人參皂苷Rb1、Re 、Rg1含量

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備注：

參考文獻(xiàn)：

任睿，賈宜軍，金紅宇. HPLC測定益氣復(fù)脈口服液中紅參的含量. 現(xiàn)代食品與藥品雜志.2006.16（4)：8～11

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