腦得生丸－人參皂苷Rg1的測(cè)定－薄層掃描法

本方法采用薄層掃描法測(cè)定腦得生丸中人參皂苷Rg₁的含量。

本方法適用于腦得生丸中人參皂苷Rg1含量的測(cè)定。

供試品于索氏提取器中經(jīng)乙醚加熱回流，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)�用甲醇溶解，制成供試液，點(diǎn)樣、展開(kāi)，以10%硫酸乙醇溶液顯色，用薄層掃描儀進(jìn)行掃描，于波長(zhǎng)λs=525nm， λ_R=700nm測(cè)量人參皂苷Rg₁（C₄₂H₇₂O₁₄)吸收度積分值，計(jì)算其含量。

1. 乙醚

2 .甲醇

3 .正丁醇

4 .氯仿

5 .醋酸乙酯

6 .硫酸 10％硫酸乙醇溶液

7 .乙醇

1 儀器

1.1索氏提取器

1.2薄層掃描儀

1.3點(diǎn)樣器

一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點(diǎn)樣器材。

1.4展開(kāi)室

可用適合薄層板大小的專(zhuān)用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

2 材料

2.1高效硅膠G薄層板

2.2硅藻土

1. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取人參皂苷Rg₁對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取供試品，切碎，精密稱(chēng)取 約2g，加硅藻土 2g，研勻，置索氏提取器中，加乙醚適量，置水浴上回流2小時(shí)，棄去乙醚液，取出濾紙筒，晾干，待乙醚揮盡，將濾紙筒再置于索氏提取器中，加甲醇適量，放置過(guò)夜，加熱回流提取至回流液無(wú)色，回收甲醇至干。殘?jiān)�加�?0mL使溶解，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用水飽和的正丁醇提取5次（25mL、20mL、20mL、10mL、10mL)，合并提取液，用正丁醇飽和的水洗滌 3次，每次 25mL，棄去水層，提取液減壓回收正丁醇，殘?jiān)�加甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至 5mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱(chēng)取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

1. 薄層板制備

用商品預(yù)制板－高效硅膠G薄層板。

2. 點(diǎn)樣

精密吸取供試品溶液 2～4μL、對(duì)照品溶液 2μL與 4μL，分別交叉點(diǎn)于同一高效硅膠G薄層板上，如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。

3. 展開(kāi)

將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開(kāi)缸的展開(kāi)劑中，以氯仿－醋酸乙酯－甲醇－水（15：4O：22：10)5～10℃放置12小時(shí)的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，于110℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，取出。

4. 含量測(cè)定

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周?chē)�用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，進(jìn)行掃描，波長(zhǎng)：λs=525nm， λ_R=700nm， 測(cè)量供試品吸收度積分值與對(duì)照品吸收度積分值，計(jì)算。

用外標(biāo)法測(cè)定時(shí)，若對(duì)照品各數(shù)據(jù)點(diǎn)在校正曲線上呈一通過(guò)原點(diǎn)的直線時(shí)，可用一點(diǎn)法校正，如不通過(guò)原點(diǎn)通常宜采用二點(diǎn)法校正，必要時(shí)用多點(diǎn)法校正。