方法名稱(chēng):
山楂葉—總黃酮的測(cè)定—分光光度法…" />
方法名稱(chēng): |
山楂葉—總黃酮的測(cè)定—分光光度法 |
應(yīng)用范圍: |
本方法采用分光光度法測(cè)定山楂葉中總黃酮(以無(wú)水蘆丁計(jì)算)的含量。 本方法適用于薔薇科植物山里紅Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.或山楂Crataegus pinnatifida Bge.的干燥葉。 |
方法原理: |
本品細(xì)粉置于索氏提取器中,依次加入三氯甲烷和甲醇提取,蒸干,加稀乙醇溶解,濾過(guò),續(xù)濾液中依次加入水、5%亞硝酸鈉溶液、10%硝酸鋁溶液、氫氧化鈉試液一定量,搖勻,放置,立即置紫外可見(jiàn)分光光度計(jì), 于波長(zhǎng)500nm處測(cè)定吸光度,以無(wú)水蘆。–27H30O16)計(jì)算總黃酮含量。 |
試劑: |
1. 三氯甲烷 2 .5%亞硝酸鈉溶液 3 .10%硝酸鋁溶液 4.氫氧化鈉試液 |
儀器設(shè)備: |
1. 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì) 2. 索氏提取器 |
試樣制備: |
對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取在120℃干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品25mg,置50mL量瓶中,加乙醇適量,超聲處理使溶解,放冷,加乙醇至刻度,搖勻。精密量取20mL,置50mL量瓶中,加水至刻度,搖勻,制成每1 mL中含無(wú)水蘆丁0.2mg的溶液。 |
操作步驟: |
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密量取對(duì)照品溶液1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5 mL、6 mL,分別置25 mL量瓶中,各加水至6 mL,加5%亞硝酸鈉溶液1 mL,搖勻,放置6分鐘,加10%硝酸鋁溶液1 mL,搖勻,放置6分鐘,加氫氧化鈉試液10 mL,再加水至刻度,搖勻,放置15分鐘,以相應(yīng)試劑為空白,立即照分光光度法,在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 2. 供試品的測(cè)定 取本品細(xì)粉1g,精密稱(chēng)定,置索氏提取器中,加三氯甲烷加熱回流提取至提取液無(wú)色,棄去三氯甲烷液,藥渣揮去三氯甲烷,加甲醇繼續(xù)提取至無(wú)色(約4小時(shí)),提取液蒸干,殘?jiān)酉∫掖既芙,轉(zhuǎn)移至50 mL量瓶中,加稀乙醇至刻度,搖勻,作為供試品儲(chǔ)備液。取供試品儲(chǔ)備液,濾過(guò),精密量取續(xù)濾液5 mL,置25 mL量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,精密量取2mL,置25mL量瓶中,加水至6 mL,加5%亞硝酸鈉溶液1 mL,搖勻,放置6分鐘,加10%硝酸鋁溶液1 mL,搖勻,放置6分鐘,加氫氧化鈉試液10 mL,再加水至刻度,搖勻,放置15分鐘,以相應(yīng)試劑為空白,立即照分光光度法,在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中無(wú)水蘆丁的重量,計(jì)算。 |
參考文獻(xiàn): |
中華人民共和國(guó)藥典,國(guó)家藥典委員會(huì)編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005年版,一部,p.22。 |