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葛根芩連微丸—葛根素的測定—高效液相色譜法

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫中心 藥學(xué)論壇 葛根芩連微丸—葛根素的測定—高效液相色譜法
方法名稱:
葛根芩連微丸—葛根素的測定—高效液相色譜法
應(yīng)用范圍:

本方法采用高效液相色譜法測定葛根芩連微丸中葛根素的含量。

本方法適用于中成藥葛根芩連微丸。

方法原理:

供試品加甲醇進行熱回流,放冷,濾過,濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長250nm處檢測葛根素(C21H20O9)的吸收值,計算出其含量。

試劑:

1. 甲醇(色譜純)

2. 乙腈

儀器設(shè)備:

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

ODS柱(250 × 4mm, 5μm)

1.3 紫外-可見二極管陣列檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相:甲醇 乙腈 水 =12 8 80

2.2 檢測波長:250nm

2.3柱溫:室溫

試樣制備:

1. 稱取供試品

精密稱取本品粉末(過五號篩-80目)約0.3g。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取葛根素對照品,加乙醇制成每1mL含0.5mg的溶液,作為對照品溶液。

3. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

分別精密量取對照品溶液0.20、0.40、0.60、0.80,1.00mL,置于5mL棕色量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,作為繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4. 供試品溶液的制備

將供試品置于三角燒瓶中,精密加入甲醇50mL,稱定,水浴加熱回流提取1 h,放冷至室溫,精密稱量,用甲醇補足損失的重量,搖勻,過濾。取續(xù)濾液,用0.45μm微孔濾膜過濾,取續(xù)濾液為供試品溶液。

注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟:

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

分別精密吸取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液5µL,進入高效液相色譜儀,用紫外檢測器測定葛根素的吸收值,以峰面積積分值對標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,進行線性回歸,得到回歸方程。

2.供試品的測定

分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各5μL注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器,于波長250nm處測定葛根素(C21H20O9)的吸收值,計算出其含量。

參考文獻:

吳紹輝、譚曉梅、羅佳波等. 高效液相色譜法測定葛根芩連微丸中葛根素的含量. 中國實驗方劑學(xué)雜志,1999,5(6):9-11.

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