方法名稱： |
注射用雙黃連（凍干)—連翹甙的測(cè)定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定注射用雙黃連（凍干)中連翹甙的含量。 本方法適用于中藥制劑注射用雙黃連（凍干)。 |
方法原理： |
供試品于分液漏斗中，加水溶解，以氯仿提取，收集氯仿液，水浴濃縮至干，殘?jiān)蛹状既芙舛ㄈ�，過濾，濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)276nm處檢測(cè)連翹甙的吸收值，計(jì)算出其含量。 |
試劑： |
1.甲醇（色譜純) 2. 冰乙酸 3. 氯仿 |
儀器設(shè)備： |
1. 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 YMG C18色譜柱（200×4.6mm，5μm)，理論塔板數(shù)以連翹甙峰計(jì)算不低于1000。 1.3 紫外吸收檢測(cè)器 2. 色譜條件 2.1 流動(dòng)相：甲醇 水 冰乙酸 = 40 60 1 2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：276nm 2.3柱溫：室溫 |
試樣制備： |
1. 稱取供試品 精密稱取本品粉末（過五號(hào)篩-80目)試樣60.0mg。 2. 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取連翹甙對(duì)照品適量，用甲醇溶解并稀釋成每1mL含0.1mg連翹苷的對(duì)照品溶液。 3.供試品溶液的制備 將供試品置分液漏斗中，加水20mL使溶解，以氯仿提取4次（20，10，20，10mL)，收集氯仿液，水浴濃縮至干，殘?jiān)约状既芙�，并定量轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，過濾，取續(xù)濾液為供試品溶液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 精密吸取上述對(duì)照品溶液0.5，1.0，2.0，4.0，8.0，16.0，25.0μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)276nm處測(cè)定連翹甙的吸收值，以進(jìn)樣量對(duì)峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。 2. 供試品的測(cè)定 分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)276nm處測(cè)定連翹甙的吸收值，計(jì)算出其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
郭淑敏，胡麗君，張麗敏等. 高效液相色譜法測(cè)定注射用雙黃連中連翹甙的含量. 中國(guó)中醫(yī)藥科技，1997，4（2)：93-94. |
