桂龍咳喘寧膠囊—肉桂酸的測(cè)定—高效液相色譜法 2

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定桂龍咳喘寧膠囊中肉桂酸的含量。

供試品藥粉于錐形瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液，加50%甲醇-水（磷酸調(diào)pH為3.0)溶液，浸泡超聲后，放冷，濾過，濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)278nm處檢測(cè)肉桂酸的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇（色譜純)

2. 磷酸

3. 三乙胺

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

日本Inerstil ODS-3 C₁₈色譜柱（250×4.6mm，5μm)。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：甲醇 水 三乙胺 磷酸 = 70 30 0.2 0.05

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：278nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱取本品藥粉試樣0.3g。

2. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

精密稱取內(nèi)標(biāo)丹皮酚對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶液配成0.4g/L的內(nèi)標(biāo)溶液。

3. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取肉桂酸對(duì)照品10mg，置50mL量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，得肉桂酸對(duì)照品儲(chǔ)備液。

4. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

分別精密量取0.5，1.0，2.0，3.0，5.0mL肉桂酸對(duì)照品儲(chǔ)備液，分別置10mL量瓶中，各加1mL丹皮酚內(nèi)標(biāo)溶液，加流動(dòng)相至刻度，混勻，作為繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。

5.供試品溶液的制備

將供試品置25mL錐形瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液1.5mL，加50%甲醇-水（磷酸調(diào)pH為3.0)13.5 mL（稱重)，搖勻，浸泡30分鐘，超聲25分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醇-水（磷酸調(diào)pH為3.0)補(bǔ)足減失的重量，混勻，濾過，取續(xù)濾液為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

精密吸取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液20μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)278nm處測(cè)定肉桂酸的吸收值，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對(duì)供試品與內(nèi)標(biāo)峰的峰面積比值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測(cè)定

精密吸取供試品溶液20μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)278nm處測(cè)定肉桂酸的吸收值，計(jì)算出其含量。

劉傳華，陳滬寧，劉師蓮等. RP-HPLC測(cè)定桂龍咳喘寧膠囊中肉桂酸的含量. 中國(guó)中藥雜志，2004，29（3)：276-277.