酚咖片—對乙酰氨基酚與咖啡因的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定酚咖片中對乙酰氨基酚（C₈H₉NO₂)與咖啡因（C₈H₁₀N₄O₂)的含量。

本方法適用酚咖片。

將供試品精密加入內標溶液，加流動相適量溶解并定量稀釋。搖勻，過濾，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長275nm處檢測對乙酰氨基酚與咖啡因和內標苯甲酸的吸收值，計算出其含量。

1. 甲醇

2. 冰醋酸

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，對乙酰氨基酚與咖啡因峰與內標峰的分離度應符合要求。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 水 冰醋酸= 28 69 3

2.2 檢測波長：275nm

2.3 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于對乙酰氨基酚0.25g)，置100mL量瓶中。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取對乙酰氨基酚對照品與咖啡因對照品適量，置同一量瓶中，加甲醇-冰醋酸（95:5)溶解并定量稀釋制成每1mL含2.5mg與0.3mg的溶液，搖勻，精密量取續(xù)濾液2mL置50mL量瓶中，加內標溶液5mL，加甲醇-冰醋酸（95:5)稀釋至刻度，搖勻，即得。

3. 內標溶液的制備

取苯甲酸適量，加甲醇稀釋制成每1mL含3.5mg的溶液，即得。

4. 供試品溶液的制備

上述供試品加入甲醇-冰醋酸（95:5)約75mL，振搖30分鐘使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液2mL置50mL量瓶中，加內標溶液5mL，加甲醇-冰醋酸（95:5)稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述對照品溶液和供試品溶液10μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長275nm處測定對乙酰氨基酚與咖啡因及內標苯甲酸的吸收值，按內標法以峰面積分別計算對乙酰氨基酚與咖啡因的含量，即得。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.651。